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公开(公告)号:CN111500774B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202010352210.2
申请日:2020-04-28
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
Abstract: 本发明涉及一种流行性出血病病毒及血清型鉴定RT‑PCR试剂盒,属于兽医传染病检测技术领域。本试剂盒包括:(1)检测流行性出血病病毒的特异性引物,核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.2所示;(2)8对检测不同血清型流行性出血病病毒的引物对,核苷酸序列如SEQ ID NO.3‑SEQ ID NO.18所示;(3)反应试剂与阳性、阴性核酸对照。本发明具有灵敏度高、特异性好、快速简便、成本低廉的优势,一方面不仅可准确的对EHDV及其血清型进行鉴定,另一方面通过对扩增病毒的核酸序列测序,获取流行性出血病病毒的关键遗传特征,为分析病毒的进化特征提供数据。
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公开(公告)号:CN110669870B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN201910979854.1
申请日:2019-10-15
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种帕利亚姆血清群病毒血清型的实时荧光定量RT‑PCR检测引物、探针及检测试剂盒,属于动物病毒分子生物检测技术领域。该试剂盒包括3对引物;还包括与三对引物对配合使用的三条探针、阴性对照模板、阳性对照模板、标准品模板和PCR扩增试剂。阴性对照模板为RNase‑free水;阳性对照模板分别为CHUV、BCV和DAV灭活病毒;标准品模板为CHUV、BCV和DAV基因节段2单链RNA。采用本发明试剂盒能够检出流行于中国的三种血清型PALV,具有特异、敏感、快速和高效等优势;并且配合利用标准品模板建立的标准曲线能够对临床样本内PALV各血清型毒株的RNA进行定量检测,大大提高了工作效率。
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公开(公告)号:CN110643740B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN201910979852.2
申请日:2019-10-15
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
Abstract: 本发明涉及帕利亚姆血清群病毒的实时荧光定量RT‑PCR检测引物、探针及检测试剂盒,属于动物病毒分子生物检测技术领域。该试剂盒包括上游引物、下游引物、与引物配合使用的探针、阴性对照模板、阳性对照模板、标准品模板和PCR扩增试剂。采用试剂盒进行检测,反应速度快,整个扩增过程不到1个小时;且只需要提取病毒RNA,无需进行反转录,操作步骤少且简便,能够有效地避免RNA降解和污染;同时,在qRT‑PCR扩增完成后,无需琼脂糖凝胶电泳即可直接判断待检样品是否有PALV RNA的存在;并且配合利用标准品模板建立的标准曲线能够对临床样本内PALV RNA进行定量检测,大大提高工作效率,降低了检测成本。
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公开(公告)号:CN113265488B
公开(公告)日:2022-11-08
申请号:CN202110587459.6
申请日:2021-05-27
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种共同检测流行性出血病病毒和帕利亚姆血清群病毒的RPA‑LFD引物、探针及试剂盒,属于动物病毒分子生物学检测技术领域。本发明设计了共同检测EHDV和PALV的引物和nfo探针,并在此基础上构建一种能够共同检出流行于中国的EHDV和PALV核酸的RPA‑LFD检测试剂盒,该试剂盒具有特异、敏感、快速、高效以及能够等温扩增并用于现场快速诊断等优势,易于推广应用。
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公开(公告)号:CN113265488A
公开(公告)日:2021-08-17
申请号:CN202110587459.6
申请日:2021-05-27
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种共同检测流行性出血病病毒和帕利亚姆血清群病毒的RPA‑LFD引物、探针及试剂盒,属于动物病毒分子生物学检测技术领域。本发明设计了共同检测EHDV和PALV的引物和nfo探针,并在此基础上构建一种能够共同检出流行于中国的EHDV和PALV核酸的RPA‑LFD检测试剂盒,该试剂盒具有特异、敏感、快速、高效以及能够等温扩增并用于现场快速诊断等优势,易于推广应用。
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公开(公告)号:CN110643741A
公开(公告)日:2020-01-03
申请号:CN201910980388.9
申请日:2019-10-15
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
Abstract: 本发明涉及帕利亚姆血清群病毒群特异性与血清型特异性RT-PCR检测引物及试剂盒,该试剂盒包括4对引物,分别为PALV-S7-F和PALV-S7-R、CHUV-S2-F和CHUV-S2-R、BCV-S2-F和BCV-S2-R、DAV-S2-F和DAV-S2-R;还包括空白对照模板、阳性对照模板和PCR扩增试剂。采用本发明试剂盒可以进行PALV群特异性RT-PCR检测,能够准确检测出样品中的PALV病毒;之后通过本发明试剂盒,进行PALV血清型特异性RT-PCR检测,可对CHUV、BCV与DAV毒株的血清型进行判断;检测结果准确、可靠,为我国PALV的流行病学调查提高了强有力的技术支持。
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公开(公告)号:CN111500773B
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202010351199.8
申请日:2020-04-28
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种流行性出血病病毒血清型鉴定荧光定量RT‑PCR引物、探针和试剂盒,属于兽医传染病检测技术领域。该试剂盒包括:(1)8种不同血清型流行性出血病病毒的引物对和与引物对配合使用的探针;(2)荧光定量RT‑PCR反应试剂、8种不同血清型流行性出血病病毒的阳性质控品与阴性质控品。本发明试剂盒具有灵敏度高和特异性强的优点,通过本发明试剂盒可以对病毒和临床血液样品中的流行性出血病病毒核酸进行血清型分型,从而实现流行性出血病病毒的早期快速诊断和流行趋势监控。
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公开(公告)号:CN113462816B
公开(公告)日:2022-11-08
申请号:CN202110701784.0
申请日:2021-06-23
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种西藏环状病毒、版纳病毒和芒市病毒的快速一步法RT‑LAMP可视化检测试剂盒,属于动物虫媒病毒检测技术领域。该试剂盒包括引物组、显色物质和反应试剂组、阳性对照和阴性对照;所述引物组包括用于检测TIBOV的特异性RT‑LAMP引物组、用于检测BAV的特异性RT‑LAMP引物组和用于检测MSV的特异性RT‑LAMP引物组;所述阳性对照为TIBOV、BAV和MSV的重组质粒;阴性对照为DEPC处理ddH2O。通过本发明试剂盒的RT‑LAMP方法能够快速诊断样品中携带的TIBOV、BAV或MSV,设备简单,操作简便,灵敏度高和特异性强,适用现场诊断,易于推广应用。
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公开(公告)号:CN113462816A
公开(公告)日:2021-10-01
申请号:CN202110701784.0
申请日:2021-06-23
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种西藏环状病毒、版纳病毒和芒市病毒的快速一步法RT‑LAMP可视化检测试剂盒,属于动物虫媒病毒检测技术领域。该试剂盒包括引物组、显色物质和反应试剂组、阳性对照和阴性对照;所述引物组包括用于检测TIBOV的特异性RT‑LAMP引物组、用于检测BAV的特异性RT‑LAMP引物组和用于检测MSV的特异性RT‑LAMP引物组;所述阳性对照为TIBOV、BAV和MSV的重组质粒;阴性对照为DEPC处理ddH2O。通过本发明试剂盒的RT‑LAMP方法能够快速诊断样品中携带的TIBOV、BAV或MSV,设备简单,操作简便,灵敏度高和特异性强,适用现场诊断,易于推广应用。
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公开(公告)号:CN113337643A
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN202110722948.8
申请日:2021-06-28
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种检测蓝舌病病毒、动物流行性出血病病毒和帕利亚姆病毒的RT‑LAMP引物组及试剂盒,包括引物组Ι、引物组Ⅱ和引物组Ⅲ;引物组I由BTV‑F3、BTV‑B3、BTV‑FIP、BTV‑BIP、BTV‑LB和BTV‑LF组成;引物组II由EHDV‑F3、EHDV‑B3、EHDV‑FIP、EHDV‑BIP、EHDV‑LB和EHDV‑LF组成;引物组III由PALV‑F3、PALV‑B3、PALV‑FIP、PALV‑BIP和PALV‑LF组成。本发明RT‑LAMP检测方法具有高特异性和灵敏度,可快速、准确的检测出BTV、EHDV和PALV,具有重大的推广价值。
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