公开(公告)号：CN106718886B

公开(公告)日：2019-03-12

申请号：CN201611076580.8

申请日：2016-11-30

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 姜华 ,  何承刚 ,  毕玉芬 ,  辛培尧 ,  段新慧 ,  单贵莲 ,  韩博 ,  罗富成 ,  赵雁 ,  马向丽

IPC: A01H4/00

Abstract: 提供一种白三叶(Trifoliumrepens L.)无菌苗组织培养及快速繁殖的方法，该方法包括取白三叶的种子进行消毒、诱导分化、壮苗、生根培养及移栽等步骤。通过本发明的方法，繁育的白三叶无菌苗在两月内可增殖系数为20，丛生芽诱导分化率为95％，平均生根率为99％，平均移栽成活率为97％，极大地提高了白三叶的繁殖系数，建立了高效稳定的无菌苗组织培养及快速繁殖技术，为白三叶种苗脱毒、进行白三叶基因工程改良及种质创新研究提供有效的繁殖方法。

公开(公告)号：CN106718886A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611076580.8

申请日：2016-11-30

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 姜华 ,  何承刚 ,  毕玉芬 ,  辛培尧 ,  段新慧 ,  单贵莲 ,  韩博 ,  罗富成 ,  赵雁 ,  马向丽

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/001 ,  A01H4/008

Abstract: 提供一种白三叶(Trifoliumrepens L.)无菌苗组织培养及快速繁殖的方法，该方法包括取白三叶的种子进行消毒、诱导分化、壮苗、生根培养及移栽等步骤。通过本发明的方法，繁育的白三叶无菌苗在两月内可增殖系数为20，丛生芽诱导分化率为95％，平均生根率为99％，平均移栽成活率为97％，极大地提高了白三叶的繁殖系数，建立了高效稳定的无菌苗组织培养及快速繁殖技术，为白三叶种苗脱毒、进行白三叶基因工程改良及种质创新研究提供有效的繁殖方法。

公开(公告)号：CN103063758A

公开(公告)日：2013-04-24

申请号：CN201210513000.2

申请日：2012-12-04

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 姜华 ,  何承刚 ,  毕玉芬 ,  单贵莲 ,  马向丽 ,  辛培尧

IPC: G01N30/02

Abstract: 紫花苜蓿叶黄素循环组分的检测方法，取紫花苜蓿鲜叶0.1g,倒入液氮研磨至粉末状，加入85%丙酮，匀浆2-3 min，再加入100%丙酮，匀浆1 min之后置于冰上15 min，1200g离心10 min，取上清液用0.45 µm微孔滤膜过滤后，取10 µl进样到美国Agilent 1100高效液相色谱仪中采用浓度线性梯度洗脱，用美国Agilent Hypersil ODS（4.0×250 mm，5 µm）色谱柱，流动相A液为100%乙腈，B液为100%水，浓度线性梯度洗脱程序为90% A液 + 10% B液洗脱15 min，接着在5min内，90% A液浓度线性递增至100%的A液，之后再洗脱20 min，流速1 ml/min，检测波长445 nm，柱子温度30℃。最后检测出紫花苜蓿叶黄素循环组分玉米黄质（Z）、环氧玉米黄质（A）和紫黄质（V）的含量。