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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105586334B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610065875.9
申请日：2016-01-29
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法，与现有技术相比，本发明直接以黑痣菌子囊果为材料，进行DNA提取的方法。在进行DNA提取前，采用裂解液缓冲液处理2次，利用低温下DNA溶解度低的原理去除过多的胶质和多糖，最后加入提取液裂解细胞膜，进行DNA的提取，提取过程中加苯酚‑氯仿‑异戊醇进行抽提去除多余的蛋白。本方法适用于含有胶质和多糖、蛋白等含量高的较高的真菌材料，此类杂质存在和含量对所抽提到的DNA的产量和质量均无明显的影响，为黑痣菌的后续分子研究提供了保证，具有推广使用的价值。
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公开(公告)号：CN105181965A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510602926.2
申请日：2015-09-21
Applicant: 云南农业大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56961
Abstract: 本发明公开了一种检测稻瘟菌效应蛋白从水稻根部转移至叶缘的方法，它涉及植物保护和生物技术领域，它将稻瘟病菌效应蛋白基因表达产物于4℃离心机离心收集菌体，用新鲜配制的缓冲液悬浮菌体，在冰水浴上进行超生破碎细胞后离心收集上清，将该原核表达产物，利用GST纯化柱纯化，将纯化后的表达产物按照5.0mg/ml的浓度处理感病水稻品种丽江新团黑谷的根尖0.5cm处6h，灭菌水漂洗4h，将处理后的水稻植株的叶片进行石蜡切片，用免疫细胞化学方法处理水稻叶片切片，共聚焦显微镜观察根尖皮层细胞微管骨架；它鉴定到了一种从水稻根部转移至地上部叶缘的稻瘟病菌效应蛋白，可为今后进一步研究提供重要的实验依据。
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公开(公告)号：CN105177145A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510604347.1
申请日：2015-09-21
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种检测稻瘟菌基因增强稻瘟病菌株致病力的方法，它涉及植物保护和生物技术领域，调查水稻抗感反应、real-time RT-PCR分析水稻早期响应的防御相关基因表达以及qPCR检测病斑的真菌相对生长量。基因的原核表达产物按照1.0μg/ml~6.0 μg/ml浓度喷雾水稻叶片24h再接种强/弱致病菌株，调查抗感反应以及real-time RT-PCR分析水稻防御相关基因表达；再利用该基因的过表达菌株离体接种水稻叶片，调查抗感反应、real-time RT-PCR分析水稻防御相关基因表达以及qPCR分析病斑上的真菌相对生长量。它可全面准确地明确病原菌效应蛋白基因提高病原菌侵染力，最终达到为今后测定病原菌效应蛋白提高病原菌侵染力的方法提供准确全面的方法的目的。
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公开(公告)号：CN105177107A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510602667.3
申请日：2015-09-21
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测稻瘟菌基因促进稻瘟病菌菌丝生长和产孢的方法，它涉及植物保护和生物技术领域，它将基因的原核表达产物加于培马铃薯蔗糖养基中，再将菌落接种于含有原核表达产物的PSA培养基中于28℃振荡培养箱中培养三天，过滤菌丝烘干称重；同时收集滤液，进行孢子计数。它提供一种更为简便、快速的确定病菌基因对病菌自身的影响，为更准确分析基因功能奠定重要的实验基础。
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公开(公告)号：CN105586334A
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201610065875.9
申请日：2016-01-29
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法，与现有技术相比，本发明直接以黑痣菌子囊果为材料，进行DNA提取的方法。在进行DNA提取前，采用裂解液缓冲液处理2次，利用低温下DNA溶解度低的原理去除过多的胶质和多糖，最后加入提取液裂解细胞膜，进行DNA的提取，提取过程中加苯酚-氯仿-异戊醇进行抽提去除多余的蛋白。本方法适用于含有胶质和多糖、蛋白等含量高的较高的真菌材料，此类杂质存在和含量对所抽提到的DNA的产量和质量均无明显的影响，为黑痣菌的后续分子研究提供了保证，具有推广使用的价值。
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