公开(公告)号：CN113846186B

公开(公告)日：2025-04-18

申请号：CN202111218410.X

申请日：2021-10-20

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 陈培富 ,  邓晏琼 ,  何依蓉 ,  李德氾 ,  鲁琼芬 ,  王腾芬

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种动物β冠状病毒通用检测引物及检测方法，属于生物技术领域，具体步骤为：设计β冠状病毒属RdRp基因引物βF1和βR1，合成并纯化；体外合成cDNA：提取病毒RNA，加入随机引物及dNTPs，由逆转录酶催化合成cDNA；配制包含引物βF1和βR1的PCR扩增体系；执行扩增程序；产物检查：采用1％琼脂糖凝胶电泳。本发明以β冠状病毒属RdRp基因为目标基因设计检测引物，使用该引物扩增β冠状病毒核酸的效果好，特异性强，灵敏度高，检测SARS‑CoV‑2可低至310个核酸拷贝，对检测β冠状病毒属成员具有通用性。

公开(公告)号：CN113846186A

公开(公告)日：2021-12-28

申请号：CN202111218410.X

申请日：2021-10-20

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 陈培富 ,  邓晏琼 ,  何依蓉 ,  李德氾 ,  鲁琼芬 ,  王腾芬

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种动物β冠状病毒通用检测引物及检测方法，属于生物技术领域，所述的动物β冠状病毒通用检测方法具体步骤为：设计β冠状病毒属RdRp基因引物βF1和βR1，合成并纯化；体外合成cDNA：提取病毒RNA，加入随机引物及dNTPs，由逆转录酶催化合成cDNA；配制包含引物βF1和βR1的PCR扩增体系；扩增：95℃预变性10min，94℃变性1min，53℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环，再于72℃延伸10min；产物检查：采用1％琼脂糖凝胶电泳。本发明以β冠状病毒属RdRp基因为目标基因设计一对检测引物，经扩增、测序检验，使用该引物扩增β冠状病毒核酸的效果好，特异性强，不会扩增非β冠状病毒核酸，灵敏度高，检测SARS‑CoV‑2可低至310个核酸拷贝，对检测β冠状病毒属成员具有通用性。