公开(公告)号：CN105734138A

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201610182483.0

申请日：2016-03-28

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 许俊强 ,  张应华 ,  曹绍玉 ,  毕保良 ,  董玉梅 ,  于晓俊

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12Q1/6897

Abstract: 本发明涉及一种基于四环素调控系统检测叶绿体启动子活性的方法，属植物质体基因工程研究技术领域。本发明的方法以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础，生物合成带有四环素核心操控区的prrnO1O2启动子，并在原核细胞中验证该启动子的活性，在该启动子的驱动下GFP基因表达；构建四环素诱导表达载体，筛选出适应细菌生长的最高四环素使用浓度为5μg/mL；最后构建四环素调控系统下的GFP表达载体，在未加入四环素时，prrnO1O2启动子的功能被抑制，加入四环素后，GFP基因表达出绿色荧光蛋白。本发明的有益效果在于：利用四环素调控系统控制叶绿体启动子的活性，从而避开了核基因组对质体基因组的调控干扰，为进一步的质体基因工程育种提供有有效的方法和途径。

公开(公告)号：CN105734138B

公开(公告)日：2021-05-07

申请号：CN201610182483.0

申请日：2016-03-28

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 许俊强 ,  张应华 ,  曹绍玉 ,  毕保良 ,  董玉梅 ,  于晓俊

IPC: C12Q1/6865 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明涉及一种基于四环素调控系统检测叶绿体启动子活性的方法，属植物质体基因工程研究技术领域。本发明的方法以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础，生物合成带有四环素核心操控区的prrnO1O2启动子，并在原核细胞中验证该启动子的活性，在该启动子的驱动下GFP基因表达；构建四环素诱导表达载体，筛选出适应细菌生长的最高四环素使用浓度为5μg/mL；最后构建四环素调控系统下的GFP表达载体，在未加入四环素时，prrnO1O2启动子的功能被抑制，加入四环素后，GFP基因表达出绿色荧光蛋白。本发明的有益效果在于：利用四环素调控系统控制叶绿体启动子的活性，从而避开了核基因组对质体基因组的调控干扰，为进一步的质体基因工程育种提供有有效的方法和途径。