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公开(公告)号：CN119161428A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411236837.6
申请日：2024-09-04
Applicant: 中牧实业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种截短猪肺炎支原体P65蛋白的表达制备及应用。全长猪肺炎支原体P65蛋白，其原始蛋白序列为序列表中序列2，其编码基因为序列表中序列1，截短蛋白序列为序列表中序列4，其编码基因为序列表中序列3。截短猪肺炎支原体P65蛋白的制备及应用，包括下述步骤：1)表达全长及截短猪肺炎支原体P65重组蛋白重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态，分别得到表达全长及截短猪肺炎支原体P65重组蛋白的重组菌；2)重组菌诱导表达，收集菌体并破碎，收集上清；包涵体蛋白溶解复性；4)包涵体蛋白及上清蛋白纯化；5)截短猪肺炎支原体P65重组蛋白在疫苗和抗体检测中的应用。本发明采用大肠杆菌表达系统表达截短猪肺炎支原体P65蛋白，蛋白表达量大，且稳定性极好，纯化方法简单，极大降低了生产成本，有利于推进之后的大批量生产及应用。
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公开(公告)号：CN101708159B
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200910241751.1
申请日：2009-12-04
Applicant: 中牧实业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种热敏性药物混悬剂的制备方法，将热敏性药物、助悬剂和其他辅料加入到低温球磨机中，密封，在低温球磨机中进行破碎、混合和分散均匀后，灌装后灭菌。本发明所述的制备方法可以根据热敏性药物的热稳定性和药物粒度大小目标来调节工作温度、研磨强度、研磨时间等参数，在保证达到目标粒度的情况下，有效的控制物料的温度，防止了热敏性药物的分解、变质。另外，该方法可实现在一次性同步完成破碎、混合、分散均匀多道程序，避免了传统制备工艺的多道程序需要多次转移的问题，减少了产品的污染控制环节。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101708159A
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200910241751.1
申请日：2009-12-04
Applicant: 中牧实业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种热敏性药物混悬剂的制备方法，将热敏性药物、助悬剂和其他辅料加入到低温球磨机中，密封，在低温球磨机中进行破碎、混合和分散均匀后，灌装后灭菌。本发明所述的制备方法可以根据热敏性药物的热稳定性和药物粒度大小目标来调节工作温度、研磨强度、研磨时间等参数，在保证达到目标粒度的情况下，有效的控制物料的温度，防止了热敏性药物的分解、变质。另外，该方法可实现在一次性同步完成破碎、混合、分散均匀多道程序，避免了传统制备工艺的多道程序需要多次转移的问题，减少了产品的污染控制环节。
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公开(公告)号：CN118667702A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410894812.9
申请日：2024-07-04
Applicant: 中牧实业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种猪肺炎支原体高密度发酵培养基、发酵培养工艺及其应用。该培养基，由如下组分组成：I液：5.5‑7.1g/L DMEM、2.4‑3.9g/L氯化钠、0.4‑1.2g/L氯化钾、2.4‑3.9g/L碳酸氢二钠、0.04‑0.16g/L磷酸二氢钾、0.016‑0.064g/L氯化钙、0.08‑0.16g/L氯化镁、5.5‑7.8g/L水解乳蛋白；II液：38.5‑41.2g/L酵母提取物、23.5‑27.4g/L PPLO肉粉、18.3‑21.5g/L脑心浸粉。本发明的培养原材料来源广泛、避免猪血清的使用，血清使用降低，可有效扩增猪肺炎支原体，安全，免疫原性良好，能够满足大规模生产猪肺炎支原体疫苗的需要。本发明的发酵方法可以保持猪肺炎支原体良好的生长速度和状态，菌液活菌滴度高达109～1010CCU/ml，大大提高生产效率。
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公开(公告)号：CN117756894A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311747627.9
申请日：2023-12-19
Applicant: 中牧实业股份有限公司
IPC: C07K14/03 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种可以准确定量猫鼻气管炎病毒抗原的竞争ELISA试剂盒。该试剂盒包括酶标板、猫鼻气管炎病毒阴/阳性血清、猫鼻气管炎病毒标准抗原、酶标二抗。其中所述酶标板为包被有猫鼻气管炎病毒gD重组蛋白，该蛋白的序列如序列表中序列5所示。本发明采用竞争ELISA法，使用大肠杆菌表达系统表达的猫鼻气管炎病毒gD基因重组蛋白，抗原用量少、灵敏性和特异性高，可以高效地检测是否存在猫鼻气管炎病毒抗原，同时使用不同样品还可以准确定量抗原或者疫苗中猫鼻气管炎gD基因蛋白含量或猫鼻气管炎病毒毒价。本发明试剂盒敏感性高、特异性好、且操作便捷，具有良好的市场前景。
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公开(公告)号：CN115837073A
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202211487367.1
申请日：2022-11-25
Applicant: 中牧实业股份有限公司
IPC: A61K39/125 , A61K39/39 , A61P31/14 , C12N7/06
Abstract: 本发明公开了一种猪塞尼卡谷病毒病灭活疫苗制备方法及其应用，该疫苗采用悬浮培养塞尼卡谷病毒、层析方法纯化抗原、采用优化的水佐剂制备疫苗，本方法制备的塞尼卡谷病毒灭活疫苗安全性好，能够诱导仔猪产生高水平的中和抗体，有效的保护猪群免受猪塞尼卡谷病毒强毒的攻击。
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公开(公告)号：CN117659137A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311668930.X
申请日：2023-12-07
Applicant: 中牧实业股份有限公司
IPC: C07K14/085 , A61K39/12 , A61K39/125 , A61P31/14 , C07K14/18 , C12N5/071
Abstract: 本发明公开了同时生产高滴度塞尼卡谷病毒和猪瘟病毒抗原的方法。该方法包括步骤如下：以生物反应器制备悬浮BHK‑21细胞株，分别接种塞尼卡谷种毒和猪瘟病毒，接毒后生物反应器控制参数设定为DO30～60％、pH7.0～7.4、搅拌转速50～100rpm/min、温度36.5～37.5℃，期间定时取样，以0.4％台盼蓝染色观察细胞病变情况，待细胞活率≤20％时，收获悬浮培养病毒液。本发明实现了同时对猪瘟病毒和塞尼卡谷病毒的规模化繁殖培养，且该工艺具有工艺简便、成本低、产毒效果稳定、滴度高等优势，为后期二联活疫苗的规模化生产奠定了基础。
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