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公开(公告)号:CN112921002A
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN202110084190.X
申请日:2021-01-21
Applicant: 中山大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12Q1/02 , G01N21/64 , A61K31/365 , A61K31/352 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种以人内源性TERT蛋白为靶点筛选端粒酶调控剂的细胞模型及其制备方法和应用,所述细胞模型为采用外源稳定表达人TERT蛋白的细胞作为目的报告细胞,将P2A‑GFP敲入到hTERT的3’端、终止密码子TGA的前面,并稳定转染内参蛋白,得到所述hTERT‑P2A‑GFP报告细胞系,即得。所述模型以GFP的平均荧光值作为检测指标,内源特异性、灵敏度高,操作简便快速,用于高效筛选人内源性TERT蛋白为靶点的增强或抑制端粒酶活性的天然小分子化合物,为端粒酶调控剂的筛选提供一个敏感、快速、非放射性的检测模型,用此系统还可筛选端粒酶激活剂,对抗衰老的研究和应用也具有重要意义。
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公开(公告)号:CN112921002B
公开(公告)日:2023-03-31
申请号:CN202110084190.X
申请日:2021-01-21
Applicant: 中山大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12Q1/02 , G01N21/64 , A61K31/365 , A61K31/352 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种以人内源性TERT蛋白为靶点筛选端粒酶调控剂的细胞模型及其制备方法和应用,所述细胞模型为采用外源稳定表达人TERT蛋白的细胞作为目的报告细胞,将P2A‑GFP敲入到hTERT的3’端、终止密码子TGA的前面,并稳定转染内参蛋白,得到所述hTERT‑P2A‑GFP报告细胞系,即得。所述模型以GFP的平均荧光值作为检测指标,内源特异性、灵敏度高,操作简便快速,用于高效筛选人内源性TERT蛋白为靶点的增强或抑制端粒酶活性的天然小分子化合物,为端粒酶调控剂的筛选提供一个敏感、快速、非放射性的检测模型,用此系统还可筛选端粒酶激活剂,对抗衰老的研究和应用也具有重要意义。
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