公开(公告)号：CN107365868A

公开(公告)日：2017-11-21

申请号：CN201710787571.8

申请日：2017-09-04

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  王晶 ,  王尚君 ,  傅博强 ,  唐治玉

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了一种BRAF基因和EGFR突变检测定量标准品及其制备方法和定值方法，该方法分别构建含有BRAF基因V600E、EGFR基因T790M、L858R和缺失突变E746_A750del突变位点的质粒，以质粒为模板进行PCR扩增，获得PCR产物经过Sanger测序验证后，与经过超声波片断化的野生型人基因组DNA通过天平称量按照一定比例进行混合，可获得BRAF基因V600E突变和EGFR基因T790M、L858R和缺失突变E746_A750del突变的定量标准品。本发明提供了定量标准品的制备方法，采用片段化的野生型人基因组DNA作为背景DNA，可以更好的模拟实际检测游离DNA样本的背景。本定量标准品的定值方法精密度好，准确度高，不依赖于DNA标准品，测量结果可溯源至国际基本单位(质量)，从而保证测量结果的可靠和可溯源。

公开(公告)号：CN107663532B

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN201710786918.7

申请日：2017-09-04

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  王晶 ,  王尚君 ,  傅博强 ,  唐治玉

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种KRAS基因突变检测定量标准品及其制备方法和定值方法，将含有KRAS基因7个常见突变型的细胞系DNA作为模板，进行PCR扩增，获得PCR产物经过Sanger测序验证后，与经过超声波片断化的野生型人基因组DNA通过天平称量按照一定比例进行混合，可获得KRAS基因7种突变的定量标准品。本发明提供了定量标准品的制备方法，采用片段化的野生型人基因组DNA作为背景DNA，可以更好的模拟实际检测样本的背景。本定量标准品的定值方法精密度好，准确度高，不依赖于DNA标准品，测量结果可溯源至国际基本单位(质量)，从而保证测量结果的可靠和可溯源。本定量标准品可用于KRAS基因突变检测方法的方法验证和质量控制。

公开(公告)号：CN107663532A

公开(公告)日：2018-02-06

申请号：CN201710786918.7

申请日：2017-09-04

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  王晶 ,  王尚君 ,  傅博强 ,  唐治玉

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种KRAS基因突变检测定量标准品及其制备方法和定值方法，将含有KRAS基因7个常见突变型的细胞系DNA作为模板，进行PCR扩增，获得PCR产物经过Sanger测序验证后，与经过超声波片断化的野生型人基因组DNA通过天平称量按照一定比例进行混合，可获得KRAS基因7种突变的定量标准品。本发明提供了定量标准品的制备方法，采用片段化的野生型人基因组DNA作为背景DNA，可以更好的模拟实际检测样本的背景。本定量标准品的定值方法精密度好，准确度高，不依赖于DNA标准品，测量结果可溯源至国际基本单位(质量)，从而保证测量结果的可靠和可溯源。本定量标准品可用于KRAS基因突变检测方法的方法验证和质量控制。