公开(公告)号：CN115595380A

公开(公告)日：2023-01-13

申请号：CN202211281262.0

申请日：2022-10-19

Applicant: 中国计量大学(CN)

Inventor： 张明洲 ,  付贤树 ,  王倩 ,  马骉 ,  孙凯

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种三重DARQ‑LAMP等温扩增技术同时检测对虾病原体的方法，包括一下步骤：S1、从被感染对虾中取出肝胰脏组织，放入冰箱中保存；S2、提取总DNA，确定提取的DNA的数量和质量。S3、qPCR引物探针设计并进行制备。S4、优化三重DARQ‑LAMP，使用三种荧光标记的探针和不同的探针浓度。S5、通过S2中制备的10倍浓度梯度的对虾白斑综合征病毒、传染性皮下和造血细胞坏死病毒、虾肝肠孢虫的基因组DNA进行灵敏度实验。每个浓度梯度取2.5μL当做模板加入到反应当中进行三重DARQ‑LAMP反应S6、通过使用基因组DNA试剂盒来提取实验病毒与菌株的基因组DNA；使用提取的DNA用于上述优化好的三重DARQ‑LAMP方法进行特异性实验。因此三重DARQ‑LAMP测定具有更高的灵敏度，可以同时检测三种病原体。