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公开(公告)号：CN117844849B
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202311776744.8
申请日：2023-12-21
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明提供了一种蒙古冰草的遗传转化方法，包括如下步骤：步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织，将愈伤组织进行继代和分化培养，获得转化受体；步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染；步骤三、对步骤二侵染后的转化受体进行暗培养筛选，筛选后采用农杆菌侵染液进行二次侵染；步骤四、对完成侵染的转化受体进行共培养，确定侵染效果。本申请设计并成功建立了蒙古冰草的遗传转化体系，将易侵染基因型蒙古冰草的侵染效率由不足5％提高到80％以上，并且在暗培养筛选2个月后，转入的目的基因仍能稳定的在蒙古冰草愈伤组织中表达，为蒙古冰草的分子育种研发提供了新方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117844849A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311776744.8
申请日：2023-12-21
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明提供了一种蒙古冰草的遗传转化方法，包括如下步骤：步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织，将愈伤组织进行继代和分化培养，获得转化受体；步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染；步骤三、对步骤二侵染后的转化受体进行暗培养筛选，筛选后采用农杆菌侵染液进行二次侵染；步骤四、对完成侵染的转化受体进行共培养，确定侵染效果。本申请设计并成功建立了蒙古冰草的遗传转化体系，将易侵染基因型蒙古冰草的侵染效率由不足5％提高到80％以上，并且在暗培养筛选2个月后，转入的目的基因仍能稳定的在蒙古冰草愈伤组织中表达，为蒙古冰草的分子育种研发提供了新方法。
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公开(公告)号：CN117025641B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202311038004.4
申请日：2023-08-17
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明涉及蒙古冰草八氢番茄红素脱氢酶基因AmPDS、特异性片段及应用，属于植物基因工程和基因编辑技术领域，蒙古冰草八氢番茄红素脱氢酶基因AmPDS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供蒙古冰草八氢番茄红素脱氢酶的特异性片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供一种重组病毒载体pTRV2‑AmPDS及其制备方法，利用所述重组病毒载体pTRV2‑AmPDS能够沉默蒙古冰草AmPDS基因，使蒙古冰草叶片变白。
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公开(公告)号：CN117025641A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311038004.4
申请日：2023-08-17
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明涉及蒙古冰草八氢番茄红素脱氢酶基因AmPDS、特异性片段及应用，属于植物基因工程和基因编辑技术领域，蒙古冰草八氢番茄红素脱氢酶基因AmPDS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供蒙古冰草八氢番茄红素脱氢酶的特异性片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供一种重组病毒载体pTRV2‑AmPDS及其制备方法，利用所述重组病毒载体pTRV2‑AmPDS能够沉默蒙古冰草AmPDS基因，使蒙古冰草叶片变白。
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公开(公告)号：CN115710590B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202211507307.1
申请日：2022-11-29
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明涉及一种野大麦农杆菌介导的愈伤侵染方法，属于转基因技术领域，所述方法包括获得愈伤组织和农杆菌侵染；所述获得愈伤组织包括种子愈伤诱导和胚性愈伤系筛选；所述的农杆菌侵染为活化农杆菌，取野大麦愈伤组织，放到侵染液中，抽真空10分钟，超声10分钟，再抽真空十分钟后置于无菌的滤纸上晾干；在23℃暗培养箱中共培养5天，进行暗培养筛选，15天后将其置于含有15mg·L‑1潮霉素的暗筛培养基上，2个月转移到光分化培养基上进行分化。本发明建立了高效的再生体系，再生率为70％，快繁系数为35，通过农杆菌侵染和调整共培养时间，侵染效
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公开(公告)号：CN115710590A
公开(公告)日：2023-02-24
申请号：CN202211507307.1
申请日：2022-11-29
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明涉及一种野大麦农杆菌介导的愈伤侵染方法，属于转基因技术领域，所述方法包括获得愈伤组织和农杆菌侵染；所述获得愈伤组织包括种子愈伤诱导和胚性愈伤系筛选；所述的农杆菌侵染为活化农杆菌，取野大麦愈伤组织，放到侵染液中，抽真空10分钟，超声10分钟，再抽真空十分钟后置于无菌的滤纸上晾干；在23℃暗培养箱中共培养5天，进行暗培养筛选，15天后将其置于含有15mg·L‑1潮霉素的暗筛培养基上，2个月转移到光分化培养基上进行分化。本发明建立了高效的再生体系，再生率为70％，快繁系数为35，通过农杆菌侵染和调整共培养时间，侵染效率达34％。
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