公开(公告)号：CN108486145A

公开(公告)日：2018-09-04

申请号：CN201810146653.9

申请日：2018-02-12

Applicant: 中国科学院遗传与发育生物学研究所

Inventor： 胡赞民 ,  范成明 ,  李冬冬 ,  王晓波 ,  陈宇红 ,  袁静 ,  韩方普 ,  张彦峰

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明提供一种基于CRISPR/Cas9的植物高效同源重组方法，根据待编辑的植物靶基因，分别构建基因编辑载体和基因同源重组载体，然后，用两种载体共同转化植物，获得转基因植株。其中，所述基因编辑载体至少包含Cas9表达框和gRNA表达元件，所述基因同源重组载体至少包含来源于菜豆黄矮病毒的复制子元件、同源左臂、待敲入基因和同源右臂。本发明将靶标供体片段和基因编辑元件分别构建在两个载体上，减少了复制子的负荷，有效增加了靶标同源片段的拷贝数，在有效地对染色体进行编辑的基础上，增加了靶标序列的拷贝数，将极大地提高同源重组的效率。