公开(公告)号：CN103789275B

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201410037633.X

申请日：2014-01-26

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 陈全姣 ,  乔煜婷 ,  隋志伟 ,  高志敏 ,  赵丽华

IPC: C12N7/02 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明是一种基于混合纤维素酯膜富集水体甲肝病毒的方法，具体是：水样预处理；通过玻璃纤维膜预过滤水样；利用混合纤维素酯膜富集水样中的甲肝病毒；提取病毒RNA，反转录，制作标准曲线；利用荧光定量PCR检测甲肝病毒；计算甲肝病毒富集效率。本发明方法构思合理，装置操作简单、轻便，适于实验室操作和野外作业；省去了常规的加入洗脱剂洗脱病毒和加入有机或无机絮凝沉淀剂沉淀病毒的二次浓缩，体积可浓缩约250倍；特别是富集效率高，PBS水样中富集效率平均达(92.62±5.17)%，东湖水样中富集效率平均也可达(79.45±12.10)%。本方法对于各种环境水体中的甲肝病毒高效精确的检测与监控具有重要意义。

公开(公告)号：CN103805716A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201410037885.2

申请日：2014-01-26

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 陈全姣 ,  隋志伟 ,  乔煜婷 ,  高志敏 ,  赵丽华

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

CPC classification number: Y02A50/451 ,  Y02A50/54 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明是一种甲肝病毒定量检测试剂盒。具体为：设计并验证了甲肝病毒特异性检测的引物对；通过对实时荧光定量PCR体系的优化，找到了适合定性和定量检测甲肝病毒的最佳荧光定量PCR条件；检测试剂盒中附带有制作标准曲线的标准物质和质控品，可以消除样本间的差异干扰，最大程度上保证定量检测的精确度和准确性，突破了以往甲肝病毒的检测方法上精确度低和不确定性大等缺点；该检测方法灵敏度高，最低检测极限可达10拷贝/μL；同时，该试剂盒重复性好，6次重复实验，组内组间差异无显著性差异（p

公开(公告)号：CN103789275A

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：CN201410037633.X

申请日：2014-01-26

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 陈全姣 ,  乔煜婷 ,  隋志伟 ,  高志敏 ,  赵丽华

IPC: C12N7/02 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明是一种基于混合纤维素酯膜富集水体甲肝病毒的方法，具体是：水样预处理；通过玻璃纤维膜预过滤水样；利用混合纤维素酯膜富集水样中的甲肝病毒；提取病毒RNA，反转录，制作标准曲线；利用荧光定量PCR检测甲肝病毒；计算甲肝病毒富集效率。本发明方法构思合理，装置操作简单、轻便，适于实验室操作和野外作业；省去了常规的加入洗脱剂洗脱病毒和加入有机或无机絮凝沉淀剂沉淀病毒的二次浓缩，体积可浓缩约250倍；特别是富集效率高，PBS水样中富集效率平均达(92.62±5.17)%，东湖水样中富集效率平均也可达(79.45±12.10)%。本方法对于各种环境水体中的甲肝病毒高效精确的检测与监控具有重要意义。