公开(公告)号：CN103204943A

公开(公告)日：2013-07-17

申请号：CN201310090044.3

申请日：2013-03-20

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 肖庚富 ,  祖向阳 ,  龚睿 ,  张哲 ,  周拯 ,  王薇 ,  王宗林 ,  金卉 ,  侯政 ,  刘海滨 ,  刘洋 ,  徐婷

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  A61K47/48 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及生物医药工程技术领域，公开了一种呼吸道合胞病毒(RSV)抗原蛋白F与抗体恒定区Fc的融合蛋白(F-Fc)的生产方法，及其作为RSV亚单位疫苗的用途。本发明首先利用分子克隆方法构建了含有RSV F蛋白与人IgG1Fc融合蛋白的真核表达载体，转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)，表达融合蛋白；采用Protein A亲和层析，得到高纯度的融合蛋白；以CpG为佐剂，用融合蛋白滴鼻免疫BABL/c鼠，激起针对RSV的特异性粘膜免疫、体液免疫以及偏向于“Th1型”且“Th1/Th2平衡”的细胞免疫，有效抑制RSV感染。

公开(公告)号：CN104087610A

公开(公告)日：2014-10-08

申请号：CN201410351890.0

申请日：2014-07-23

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 肖庚富 ,  侯政 ,  周拯 ,  王宗林 ,  王薇

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种穿梭质粒载体及其构建方法和应用。该穿梭质粒载体，穿梭质粒载体能够在酵母及大肠杆菌中穿梭，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的该穿梭质粒载体，与现有技术相比，该质粒载体实现了在酵母、细菌内穿梭，同时具备酵母中同源重组克隆、自我复制、重组子筛选的能力，以及在细菌中稳定性复制和保持、便于DNA纯化分离操作的特质。

公开(公告)号：CN104087610B

公开(公告)日：2016-04-27

申请号：CN201410351890.0

申请日：2014-07-23

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 肖庚富 ,  侯政 ,  周拯 ,  王宗林 ,  王薇

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种穿梭质粒载体及其构建方法和应用。该穿梭质粒载体，穿梭质粒载体能够在酵母及大肠杆菌中穿梭，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的该穿梭质粒载体，与现有技术相比，该质粒载体实现了在酵母、细菌内穿梭，同时具备酵母中同源重组克隆、自我复制、重组子筛选的能力，以及在细菌中稳定性复制和保持、便于DNA纯化分离操作的特质。

公开(公告)号：CN103204943B

公开(公告)日：2014-07-23

申请号：CN201310090044.3

申请日：2013-03-20

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 肖庚富 ,  祖向阳 ,  龚睿 ,  张哲 ,  周拯 ,  王薇 ,  王宗林 ,  金卉 ,  侯政 ,  刘海滨 ,  刘洋 ,  徐婷

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  A61K47/48 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及生物医药工程技术领域，公开了一种呼吸道合胞病毒(RSV)抗原蛋白F与抗体恒定区Fc的融合蛋白(F-Fc)的生产方法，及其作为RSV亚单位疫苗的用途。本发明首先利用分子克隆方法构建了含有RSV F蛋白与人IgG1Fc融合蛋白的真核表达载体，转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)，表达融合蛋白；采用Protein A亲和层析，得到高纯度的融合蛋白；以CpG为佐剂，用融合蛋白滴鼻免疫BABL/c鼠，激起针对RSV的特异性粘膜免疫、体液免疫以及偏向于“Th1型”且“Th1/Th2平衡”的细胞免疫，有效抑制RSV感染。