转基因构建物及其在制备附睾头部基因条件性敲除小鼠模型中的应用

    公开(公告)号:CN103849634A

    公开(公告)日:2014-06-11

    申请号:CN201210507321.1

    申请日:2012-11-30

    Abstract: 本发明涉及转基因构建物及其在制备附睾头部基因条件性敲除小鼠模型中的应用。具体地,发明人发现长度为1.8kb的Lcn5基因启动子序列能驱动外源基因在小鼠附睾头部(特别是中远端特定)区域表达,并由此构建了由该启动子驱动的外源Cre基因表达载体。这种转基因载体能驱动外源Cre基因在动物附睾头部特异地表达,也可以驱动其他基因如CreERT2重组酶等的表达。应用这种转基因体系制备转基因小鼠,能获得很高的基因组整合率(>25%),并可准确、高效驱动外源基因在附睾头部中远端区域表达。本发明还建立了附睾头部特定区域条件性基因敲除或过表达技术平台。

    转基因构建物及其在制备附睾头部基因条件性敲除小鼠模型中的应用

    公开(公告)号:CN103849634B

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201210507321.1

    申请日:2012-11-30

    Abstract: 本发明涉及转基因构建物及其在制备附睾头部基因条件性敲除小鼠模型中的应用。具体地,发明人发现长度为1.8kb的Lcn5基因启动子序列能驱动外源基因在小鼠附睾头部(特别是中远端特定)区域表达,并由此构建了由该启动子驱动的外源Cre基因表达载体。这种转基因载体能驱动外源Cre基因在动物附睾头部特异地表达,也可以驱动其他基因如CreERT2重组酶等的表达。应用这种转基因体系制备转基因小鼠,能获得很高的基因组整合率(>25%),并可准确、高效驱动外源基因在附睾头部中远端区域表达。本发明还建立了附睾头部特定区域条件性基因敲除或过表达技术平台。

    miRNA检测方法及应用
    10.
    发明授权

    公开(公告)号:CN104342486B

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201310326679.9

    申请日:2013-07-30

    Abstract: 本发明提供了一种miRNA检测方法及应用。具体地,本发明提供了一种检测miRNA的新方法(称为aLHCD),该方法包括:(a)将含miRNA的样品与双发夹核酸杂交探针进行液相杂交,从而形成含“miRNA‑杂交探针”的第一复合物的液相混合物;(b)对第一复合物,用限制性内切酶进行消化,形成一端保留发夹结构区的第二复合物;(c)用单链外切酶对第二复合物进行消化,形成第三复合物;(d)以经双重消化的核酸探针为模板,用引物进行PCR扩增;(e)检测PCR扩增产物的存在与否和/或数量,得出待测miRNA的检测结果。本发明方法具有高特异、高灵敏和便利性等特点,不仅可同时检测多种miRNA,还可区分miRNA及其前体。本发明方法可应用于生物学检测和临床医学。

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