公开(公告)号：CN106676075A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201510765622.8

申请日：2015-11-11

Applicant: 中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 李劲松 ,  钟翠青 ,  谢振飞 ,  尹奇

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/873 ,  C12N15/867 ,  A01K67/027

CPC classification number: A01K67/027 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/873

Abstract: 本发明涉及一种孤雌单倍体胚胎干细胞及其制备与应用。本发明提供了一种孤雌单倍体胚胎干细胞，所述孤雌单倍体胚胎干细胞的H19 DMR及IG-DMR被敲除。本发明还进一步提供了所述孤雌单倍体胚胎干细胞的制备方法，以及所述孤雌单倍体胚胎干细胞在构建基因改造半克隆动物及基因改造半克隆动物文库中的用途。本发明的孤雌单倍体胚胎干细胞能够注射到卵子中能稳定地获得存活的SC小鼠，且能有效地用于多基因遗传操作，进一步得到携带多基因遗传修饰的动物。

公开(公告)号：CN103361304A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310103236.3

申请日：2013-03-27

Applicant: 中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 李劲松 ,  杨辉 ,  施霖宇 ,  钟翠青 ,  梁丹

IPC: C12N5/0735 ,  C12N5/073 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/06 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N5/0603

Abstract: 本发明涉及孤雄单倍体干细胞系及其制法和应用。具体地，本发明人提供了一种孤雄单倍体细胞和孤雄囊胚，所述细胞或囊胚的细胞核仅包含单倍的常染色体和性染色体，所述的性染色体为X染色体，不含Y染色体。本发明的孤雄单倍体细胞可以取代精子细胞作为配体来产生可育的动物个体；本发明的孤雄单倍体细胞有利于基因操作，并且能将遗传信息传递给后代。本发明还提供了建立孤雄单倍体细胞的制备方法及其应用。

公开(公告)号：CN110095610A

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201810096299.3

申请日：2018-01-31

Applicant: 中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 李劲松 ,  蒋婧 ,  白梅竹 ,  晏萌 ,  康俊炎 ,  李林 ,  李党生

IPC: G01N33/68 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明涉及生物领域，提供了一种高通量蛋白质分析方法及其适用文库。本发明的高通量蛋白质分析方法，为采用带标签的半克隆小鼠文库，以一个或数个标签蛋白抗体对多个不同感兴趣目标蛋白进行平行指示分析，所述带标签的半克隆小鼠文库中，各半克隆小鼠为利用孤雄单倍体胚胎干细胞注入卵子后培育获得的半克隆小鼠或其有性繁殖后代，所述孤雄单倍体胚胎干细胞含有表达感兴趣目标蛋白与标签蛋白的融合蛋白的基因，所述半克隆小鼠能表达感兴趣目标蛋白与标签蛋白的融合蛋白。本发明为生物大分子的研究提供了一个适于高通量的在体、实时和动态研究的体系。

公开(公告)号：CN103361304B

公开(公告)日：2015-09-30

申请号：CN201310103236.3

申请日：2013-03-27

Applicant: 中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 李劲松 ,  杨辉 ,  施霖宇 ,  钟翠青 ,  梁丹

IPC: C12N5/0735 ,  C12N5/073 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/06 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N5/0603

Abstract: 本发明涉及孤雄单倍体干细胞系及其制法和应用。具体地，本发明人提供了一种孤雄单倍体细胞和孤雄囊胚，所述细胞或囊胚的细胞核仅包含单倍的常染色体和性染色体，所述的性染色体为X染色体，不含Y染色体。本发明的孤雄单倍体细胞可以取代精子细胞作为配体来产生可育的动物个体；本发明的孤雄单倍体细胞有利于基因操作，并且能将遗传信息传递给后代。本发明还提供了建立孤雄单倍体细胞的制备方法及其应用。

公开(公告)号：CN108368519A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201580024974.6

申请日：2015-07-02

Applicant: 中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 李劲松 ,  吴宇轩 ,  钟翠青 ,  尹奇 ,  谢振飞 ,  白梅竹

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/0735

Abstract: 本发明涉及一种孤雄单倍体胚胎干细胞及其制备与应用。本发明提供了一种孤雄单倍体胚胎干细胞，所述孤雄单倍体胚胎干细胞的H19 DMR及IG-DMR被敲除。本发明还进一步提供了所述孤雄单倍体胚胎干细胞的制备方法，以及所述孤雄单倍体胚胎干细胞在构建基因改造半克隆动物及基因改造半克隆动物文库中的用途。本发明的孤雄单倍体胚胎干细胞能够获得球形精子类似的特性，注射到卵子中能稳定地获得存活的SC小鼠，且能有效地用于多基因遗传操作，进一步得到携带多基因遗传修饰的动物。

公开(公告)号：CN110157661A

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201810147035.6

申请日：2018-02-12

Applicant: 中国科学院上海生命科学研究院

Inventor： 李劲松 ,  瞿超 ,  杨苏明

IPC: C12N5/0735

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种单倍体胚胎干细胞的分选方法。本发明提供一种单倍体胚胎干细胞的分选方法，包括：将含有单倍体胚胎干细胞的悬浮液过滤，过滤介质的过滤孔径为4-9μm，过滤压强≥0.1Pa。本发明发明人在研究中发现，利用单倍体胚胎干细胞和二倍化的细胞大小之间的差异，可以有效地对单倍体胚胎干细胞进行分选，此外，在过滤过程中，使过滤体系达到一定的过滤压强，不仅可以更高效地对单倍体胚胎干细胞进行分选，其分选获得的单倍体胚胎干细胞的增殖能力和单克隆形成能力也获得提升。