一种不需选择标记基因的洁净DNA转化植物的方法

    公开(公告)号:CN101914571A

    公开(公告)日:2010-12-15

    申请号:CN201010235218.7

    申请日:2010-07-22

    Abstract: 本发明公开了一种不需选择标记基因的洁净DNA转化植物的方法,包括以下步骤:1)、制备目的基因表达框:根据所要导入的目的基因表达框所在的质粒载体的序列特征,采用合适的限制性内切酶将构建好的目的基因表达框DNA片段从质粒载体上切割下来,通过凝胶电泳分离割胶回收,获得目的基因表达框DNA;2)、制备DNA微弹载体悬液;3)、植物愈伤组织轰击转化;4)、植株再生;5)、转基因植株的筛选。利用本发明技术进行植物转基因,能够从根本上解决选择标记基因和质粒载体框架DNA序列等多余DNA序列对转基因植物及转基因食品的影响,从而获得除目的基因表达框无其他多余DNA的转基因植株。

    获得单拷贝目的基因表达框整合之安全转基因植物的方法

    公开(公告)号:CN102533864A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210038656.3

    申请日:2012-02-20

    Abstract: 本发明公开了一种获得单拷贝目的基因表达框整合之安全转基因植物的方法,包括以下步骤:1)、植物抗性标记基因诱导剪切表达载体的构建;2)、外源基因序列DNA片段的制备;3)、DNA微弹载体悬液制备;4)、植物愈伤组织基因枪轰击转化;5)、抗性愈伤组织的筛选;6)、直接在抗性愈伤组织预分化或分化阶段进行重组酶诱导表达对标记基因相关序列进行剪切处理;7)、转基因植株的分子检测;8)、单拷贝目的基因表达框整合的转基因植株的获得和分子鉴定:对上述步骤挑选出的转基因植株,采用Southern杂交技术鉴定目的基因表达框整合的拷贝数,确定单拷贝整合的转基因植株。

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