公开(公告)号：CN1118563C

公开(公告)日：2003-08-20

申请号：CN00134185.5

申请日：2000-12-08

Applicant: 中国医学科学院血液学研究所 ,  中国医学科学院生物医学工程研究所

Inventor： 张君奎 ,  张永富 ,  张海玲 ,  杨少光 ,  田征 ,  黄志刚 ,  赵钧铭

IPC: C12M3/00

Abstract: 中空纤维模拟骨髓造血装置，也称人工骨髓，属于一种体外造血细胞培养技术，该装置由中空纤维细胞培养管、微载体支持物及密封式灌注管道系统组成，其特征是中空纤维膜管可模拟血管输送营养物质，进行气体与物质交换，排除代谢废物；微载体与贴附的基质细胞可模拟骨髓造血微环境，支持体外造血，维持造血干细胞自我更新潜能，并刺激造血细胞增殖与分化。小鼠骨髓培养和脐带血细胞培养实验证明，在没有外加细胞因子条件下，中空纤维灌注培养方式明显优于常规方瓶及液体悬浮培养的效果。

公开(公告)号：CN101525594B

公开(公告)日：2011-04-20

申请号：CN200910068510.1

申请日：2009-04-17

Applicant: 中国医学科学院血液学研究所 ,  天津昂赛细胞基因工程有限公司

Inventor： 韩忠朝 ,  郑翠玲 ,  杨少光 ,  卢士红 ,  韩之波

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种培养间充质干细胞的低血清浓度完全培养基和利用该培养基培养间充质干细胞的方法。该完全培养基包括细胞基础培养基和终浓度为1-100μl/ml胎牛血清、1-100ng/ml表皮生长因子、1-100ng/ml碱性成纤维细胞生长因子。本发明的低血清浓度完全培养基成功达到了与使用高血清浓度培养试剂持平甚至更好的促进细胞增殖的作用。培养的细胞除具有间充质干细胞的典型生物学特性外，还能表达胚胎干细胞的全能标志物和具有在体外诱导条件下高表达神经细胞特异性标志物的能力，而且细胞间批次差异小，成本低，安全性好。与以往的培养方法相比，操作简单，污染概率小，细胞培养的成功率高。

公开(公告)号：CN101525594A

公开(公告)日：2009-09-09

申请号：CN200910068510.1

申请日：2009-04-17

Applicant: 中国医学科学院血液学研究所 ,  天津昂赛细胞基因工程有限公司

Inventor： 韩忠朝 ,  郑翠玲 ,  杨少光 ,  卢士红 ,  韩之波

IPC: C12N5/08

Abstract: 本发明公开了一种培养间充质干细胞的低血清浓度完全培养基和利用该培养基培养间充质干细胞的方法。该完全培养基包括细胞基础培养基和终浓度为1－100μl/ml胎牛血清、1－100ng/ml表皮生长因子、1－100ng/ml碱性成纤维细胞生长因子。本发明的低血清浓度完全培养基成功达到了与使用高血清浓度培养试剂持平甚至更好的促进细胞增殖的作用。培养的细胞除具有间充质干细胞的典型生物学特性外，还能表达胚胎干细胞的全能标志物和具有在体外诱导条件下高表达神经细胞特异性标志物的能力，而且细胞间批次差异小，成本低，安全性好。与以往的培养方法相比，操作简单，污染概率小，细胞培养的成功率高。

公开(公告)号：CN101649305B

公开(公告)日：2013-10-16

申请号：CN200910070479.5

申请日：2009-09-17

Applicant: 中国医学科学院血液学研究所

Inventor： 韩忠朝 ,  刘蒙 ,  杨少光

IPC: C12N5/08

Abstract: 本发明公开了一种从人脐带血CD34+细胞扩增巨核祖细胞的方法，我们将磁珠分选的脐带血CD34+造血祖细胞接种于照射的人骨髓间充质干细胞上，在含有重组人血小板生成素(rhTPO)的无血清培养基中培养7天，通过细胞计数、流式细胞表型检测和巨核细胞集落形成实验(CFU-MK assay)分析扩增巨核祖细胞的效果。采用本发明的方法扩增巨核祖细胞，与现有方法相比，培养条件更接近体内天然的骨髓造血微环境，扩增巨核祖细胞的数量更多，而且间充质干细胞所分泌的细胞因子和添加的rhTPO均符合临床应用的标准。因此，本发明为巨核祖细胞体外扩增提供了一条新途径。

公开(公告)号：CN101649305A

公开(公告)日：2010-02-17

申请号：CN200910070479.5

申请日：2009-09-17

Applicant: 中国医学科学院血液学研究所

Inventor： 韩忠朝 ,  刘蒙 ,  杨少光

IPC: C12N5/08

Abstract: 本发明公开了一种从人脐带血CD34 + 细胞扩增巨核祖细胞的方法，我们将磁珠分选的脐带血CD34 + 造血祖细胞接种于照射的人骨髓间充质干细胞上，在含有重组人血小板生成素(rhTPO)的无血清培养基中培养7天，通过细胞计数、流式细胞表型检测和巨核细胞集落形成实验(CFU-MK assay)分析扩增巨核祖细胞的效果。采用本发明的方法扩增巨核祖细胞，与现有方法相比，培养条件更接近体内天然的骨髓造血微环境，扩增巨核祖细胞的数量更多，而且间充质干细胞所分泌的细胞因子和添加的rhTPO均符合临床应用的标准。因此，本发明为巨核祖细胞体外扩增提供了一条新途径。

公开(公告)号：CN1321741A

公开(公告)日：2001-11-14

申请号：CN00134185.5

申请日：2000-12-08

Applicant: 中国医学科学院血液学研究所 ,  中国医学科学院生医学工程研究所

Inventor： 张君奎 ,  张永富 ,  张海玲 ,  杨少光 ,  田征 ,  黄志刚 ,  赵钧铭

IPC: C12M3/04

Abstract: 中空纤维模拟骨髓造血装置,也称人工骨髓,属于一种体外造血细胞培养技术,该装置由中空纤维细胞培养管、微载体支持物及密封式灌注管道系统组成,其特征是中空纤维膜管可模拟血管输送营养物质,进行气体与物质交换,排除代谢废物;微载体与贴附的基质细胞可模拟骨髓造血微环境,支持体外造血,维持造血干细胞自我更新潜能,并刺激造血细胞增殖与分化。小鼠骨髓培养和脐带血细胞培养实验证明,在没有外加细胞因子条件下,中空纤维灌注培养方式明显优于常规方瓶及液体悬浮培养的效果。