一种Ilyonectria属真菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法

    公开(公告)号:CN119639585A

    公开(公告)日:2025-03-18

    申请号:CN202411913372.3

    申请日:2024-12-24

    Abstract: 本发明涉及微生物遗传转化领域,公开了一种Ilyonectria属真菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法,该制备方法,包括如下步骤:S11、制备Ilyonectria属真菌菌丝,将Ilyonectria属真菌在PDA固体培养基上培养14d后,接种至CMC液体培养基摇瓶培养4d,过滤,滤液于10000rpm离心10min,收集孢子;稀释孢子浓度至107个/mL并接种至YEPD液体培养基中摇瓶培养2d,过滤收集菌丝;S12、制备Ilyonectria属真菌原生质体,将步骤S11制备的菌丝加至酶解液中,30℃温度摇床中以150~200rpm转速酶解3~5h,过滤,滤液在4℃下离心弃上清液后加入0.7M NaCl离心,弃上清液,获得Ilyonectria属真菌原生质体。本发明构建的遗传转化,可以通过基因敲除或过表达实验以探索特定致病基因在Ilyonectria属真菌致病过程中的具体作用及其机制。

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