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公开(公告)号:CN114874999B
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202210430899.5
申请日:2022-04-22
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所 , 中国医学科学院医学实验动物研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/90 , C12N15/85 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61K39/385 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于痘苗病毒载体的新型冠状病毒病毒样颗粒疫苗。所述重组痘苗病毒是在痘苗病毒天坛株基因组中F4L基因位置上整合新冠病毒包膜蛋白E和膜蛋白M的编码基因序列,并在TK基因位置上整合新冠病毒刺突蛋白S和核衣壳蛋白N的编码基因序列构建得到的;其中,蛋白E和M的编码基因序列以5’端相对的方式连接,并分别连接在不同的启动子下游;蛋白S和N的编码基因序列以5’端相对的方式连接,并分别连接在不同的启动子下游。将此重组病毒免疫小鼠,在小鼠血清中检测到较高的S、N特异性抗体滴度,免疫后可诱导抗原特异的T细胞免疫反应。本发明提供的新冠病毒疫苗对于新型冠状病毒的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114874999A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210430899.5
申请日:2022-04-22
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所 , 中国医学科学院医学实验动物研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/90 , C12N15/85 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61K39/385 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于痘苗病毒载体的新型冠状病毒病毒样颗粒疫苗。所述重组痘苗病毒是在痘苗病毒天坛株基因组中F4L基因位置上整合新冠病毒包膜蛋白E和膜蛋白M的编码基因序列,并在TK基因位置上整合新冠病毒刺突蛋白S和核衣壳蛋白N的编码基因序列构建得到的;其中,蛋白E和M的编码基因序列以5’端相对的方式连接,并分别连接在不同的启动子下游;蛋白S和N的编码基因序列以5’端相对的方式连接,并分别连接在不同的启动子下游。将此重组病毒免疫小鼠,在小鼠血清中检测到较高的S、N特异性抗体滴度,免疫后可诱导抗原特异的T细胞免疫反应。本发明提供的新冠病毒疫苗对于新型冠状病毒的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110548134A
公开(公告)日:2019-12-10
申请号:CN201910850898.4
申请日:2019-09-10
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
Abstract: 本发明公开了Cas13a在拮抗病毒中的应用,所述Cas13a来自Leptotrichia buccalis、Listeria seeligeri、Leptotrichia shahii、Leptotrichia wadei CRISPR系统中的任一种,所述病毒为人类的DNA病毒、RNA病毒和逆转录病毒中的一种或多种。本发明通过利用上述具有较高RNase活性的Cas13a这一基因编辑技术对三种不同类型的病毒(DNA病毒、RNA病毒和逆转录病毒)在细胞内的生活周期进行抑制,结果显示出较高RNA切割活性和更加广泛的应用范围。
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公开(公告)号:CN109536529A
公开(公告)日:2019-03-29
申请号:CN201811502766.4
申请日:2018-12-10
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
IPC: C12N15/863 , C12N15/65 , C12N7/01 , C12N15/90
Abstract: 本发明建立了一种高效重组痘苗病毒载体的系统,包括高效重组痘苗病毒载体及其建立方法。本发明利用CRISPR-Cas9技术敲除痘苗病毒天坛株TK区,然后转染带有EGFP的重组质粒pJ2R-EGFP。通过荧光筛选,获得缺失TK并插入EGFP的重组病毒,建立一种高效重组痘苗病毒载体的系统。通过分子克隆技术、Western Blot实验、免疫荧光、病毒噬斑形成试验,发现在第一轮重组病毒筛选过程中重组率比传统同源重组方法有所提高。进一步利用PCR技术、琼脂糖凝胶电泳、测序验证得到的重组病毒准确在特定位点被改造。本发明将痘苗病毒载体的重组率提高,为其在疫苗载体构建、肿瘤免疫治疗等方面提供应用价值。
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公开(公告)号:CN115927215A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202310080294.2
申请日:2023-01-18
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/39 , C12N15/85 , A61K39/285 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种重组痘苗病毒及其用途,该重组痘苗病毒相对于痘苗病毒天坛株,缺失了TK基因、F4L基因和B2R基因中的至少一种。本发明的重组痘苗病毒具有低毒性、能完整复制且具有更高免疫原性的特点。因此,本发明提供的重组痘苗病毒有更高的安全性和增强的免疫原性。本发明提供的重组痘苗病毒作为疫苗具有更高的应用价值,可用于预防痘病毒科病毒的感染,以及作为病毒载体用于构建其他感染性疾病疫苗和肿瘤疫苗等。
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公开(公告)号:CN110029128A
公开(公告)日:2019-07-19
申请号:CN201910370701.7
申请日:2019-05-06
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
IPC: C12N15/863 , C12N7/01 , C12N15/113 , C12N15/90
Abstract: 本发明公开了一种高效重组且无筛选标记的痘苗病毒载体及其建立方法,利用CRISPR-Cas9技术敲除痘苗病毒天坛株TK区,然后转染带有EGFP的重组质粒pJ2R-EGFP-LoxP。通过荧光筛选,获得缺失TK并插入EGFP的重组病毒,经计算比传统同源重组的效率提高几十倍,建立一种高效重组痘苗病毒载体的系统。在此重组病毒载体的基础上,利用Cre-LoxP系统将重组病毒载体中的筛选标记EGFP删除,通过分子克隆技术、Western Blot实验、免疫荧光、PCR技术等验证得到的重组病毒准确在特定位点删除EGFP。本发明建立一种高效重组痘苗病毒载体的系统,并将痘苗病毒载体的筛选标记删除,提高了在疫苗载体构建、肿瘤免疫治疗等方面的应用价值。
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公开(公告)号:CN116200349A
公开(公告)日:2023-06-02
申请号:CN202310095863.0
申请日:2023-01-18
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/50 , C12N15/54 , C12N15/39 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/863 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种重组痘苗病毒,其与野生型痘苗病毒天坛株相比缺失TK区或同时缺失TK区和编码poxin蛋白的B2R基因并且其在缺失的TK区位置处包含插入的编码SARS‑CoV‑2刺突蛋白S的核苷酸序列。还提供了包含所述重组痘苗病毒以及可药用的载体的新型冠状病毒疫苗组合物,以及所述重组痘苗病毒用于制备预防受试者中新型冠状病毒SARS‑CoV‑2感染的疫苗组合物的用途。本发明还提供了制备重组痘苗病毒的方法。
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公开(公告)号:CN113337481A
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN202110614059.X
申请日:2021-06-02
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
IPC: C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于痘苗病毒天坛株的新型冠状病毒疫苗,在我国自主研发的天花疫苗株痘苗病毒天坛株的基础上,通过转染带有新冠刺突蛋白S编码基因及TK区同源臂的重组质粒,经过重组及筛选过程,获得在TK区导入新冠S蛋白编码序列的重组病毒TK‑S,重组病毒感染细胞后能检测到新冠S蛋白的表达。随后,将此重组病毒免疫小鼠,在小鼠血清中检测到较高的S特异性抗体滴度及中和抗体滴度。本发明建立了一种基于痘苗病毒天坛株的表达S蛋白的新型冠状病毒疫苗,可以解决目前新冠对全球公共卫生健康造成的威胁,是治疗和预防新型冠状病毒感染的得力措施。
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公开(公告)号:CN117844974A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202311774697.3
申请日:2023-12-21
Applicant: 中国医学科学院病原生物学研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种基于RAA‑LF技术的检测猴痘病毒的引物探针组合物及其用途,该引物探针组合物包含:针对N3R基因的引物对和探针;和/或针对N4R基因的引物对和探针。本发明所建立的检测方法可以操作简单快速,高特异性检测猴痘病毒DNA,具有极高的灵敏度,结合免疫层析试纸条既实现了结果的可视化,又可以保证不同环境及场地对猴痘病毒DNA的检测,检测结果稳定可靠,有望实现疫病现场或者复杂环境的快速可视化检测。
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