人睾丸特异基因HSD-1(SPAG8)编码蛋白质的生物学功能

    公开(公告)号:CN1667121A

    公开(公告)日:2005-09-14

    申请号:CN200410004791.1

    申请日:2004-03-11

    Abstract: 本发明涉及一个人睾丸特异表达的基因编码蛋白质的生物学功能,该基因命名为HSD-1,其编码蛋白质命名为hSMP-1。2003年HSD-1基因被人类基因命名数据库命名为SPAG8。内容包括:以hSMP-1蛋白作为“诱饵”,利用酵母双杂交的方法筛选人睾丸cDNA文库,得到编码RanBPM的cDNA片段。免疫组化结果显示,RanBPM在人睾丸组织中主要定位于精原细胞与初级精母细胞。之后分别从体外和体内两个方面证实了hSMP-1蛋白和RanBPM蛋白的相互作用。细胞免疫荧光结果显示,在CHO-K1细胞中,过表达的“诱饵”蛋白和“捕获”蛋白呈现完全共定位。一系列研究发现hSMP-1蛋白可调节微管的活生,参与有丝分裂的过程,引起细胞周期的变化。阐明其生理生化功能对了解基因表达调控规律和生殖细胞的发生机理具有重要的意义。

    大鼠睾丸特异性基因RSB66参与细胞周期的调控

    公开(公告)号:CN1869223A

    公开(公告)日:2006-11-29

    申请号:CN200510071066.0

    申请日:2005-05-24

    Abstract: 本发明涉及一个大鼠睾丸圆形精子细胞特异性表达的基因/蛋白,命名为RSB66基因/蛋白(GenBank注册号AY121839)。内容包括:RSB66的互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列,编码蛋白质的氨基酸序列;Northern印迹分析结果表明,该基因的表达具有组织特异性;免疫荧光实验结果显示,RSB66蛋白的表达具有精子发生周期的阶段特异性;酵母双杂交实验发现RSB66蛋白能与INCA1发生相互作用,共洗脱实验和免疫共沉淀实验验证了这两种蛋白能在体外和体内系统中发生相互作用;构建表达EGFP-RSB66蛋白的真核表达质粒,转染HeLa细胞,可引起明显的G2/M延迟。RSB66基因/蛋白的功能与精子发生中的细胞周期调控密切相关,阐明其生理生化功能对了解细胞周期的精细调控规律和生殖细胞的发生机理具有重要的意义。

    大鼠睾丸特异基因rtSH3p13的克隆及其蛋白质的生物学功能

    公开(公告)号:CN1443846A

    公开(公告)日:2003-09-24

    申请号:CN02104387.6

    申请日:2002-03-07

    Abstract: 本发明涉及一个自大鼠睾丸曲细精管区段差异表达的基因/蛋白,命名为rtSH3p13基因/蛋白(GenBank注册号AF227439)。内容包括:rtSH3p13的互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列,编码蛋白质的氨基酸序列;结构分析显示rtSH3p13蛋白羧基端包含一个SH3结构域;Northern印迹分析结果表明,该基因的表达具有组织特异性和睾丸组织发育阶段特异性;免疫组化实验结果显示,rtSH3p13蛋白的表达还具有精子发生周期的阶段特异性;免疫电镜分析结果显示,该蛋白在精子细胞中位于细胞质膜与顶体间区域;综合运用亲和层析以及细胞免疫荧光和激光共聚焦显微技术,初步确定rtSH3p13蛋白能够与synaptojaninⅠ相互作用,并且参与网格蛋白(clathrin)复合体介导的内吞作用。rtSH3p13基因/蛋白的功能与精子发生中的内吞过程等生命现象密切相关,阐明其生理生化功能对了解基因表达调控规律和生殖细胞的发生机理具有重要的意义。

    一种以RHBDD1为靶点的抗肿瘤药物筛选模型及其方法

    公开(公告)号:CN109371102A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811234898.3

    申请日:2018-10-23

    Abstract: 本发明公开了一种以RHBDD1为靶点的抗肿瘤药物筛选模型及其方法。具体地,本发明公开了一种以RHBDD1为靶点的抗肿瘤药物筛选模型,其包括RHBDD1蛋白或其截短体蛋白、荧光标记的底物短肽、脂质体转染试剂以及模型缓冲液。本发明还公开了一种建立以RHBDD1为靶点的抗肿瘤药物筛选模型的方法,其包括:a)加入RHBDD1蛋白或其截短体蛋白、荧光标记的底物短肽、脂质体转染试剂以及模型缓冲液,并混匀;b)加入待测药物;c)避光反应2~4小时;d)测量荧光值变化。因此本发明建立了以RHBDD1为靶点的药物筛选平台,进行基于RBDD1为靶点的抗肿瘤药物的筛选,为临床治疗癌症提供依据。

    大鼠睾丸高表达基因rDJL参与精子顶体形成

    公开(公告)号:CN1869222A

    公开(公告)日:2006-11-29

    申请号:CN200510071065.6

    申请日:2005-05-24

    Abstract: 本发明涉及一个自大鼠睾丸曲细精管区段差异表达的基因,命名为rDJL基因(GenBank注册号AF154849)。内容包括:rDJL的互补脱氧核糖核酸(cDNA)序列,编码蛋白质的氨基酸序列;结构分析显示rDJL蛋白氨基端包含一个J结构域;Real Time PCR和Northern印迹分析结果表明,该基因的表达具有组织特异性和睾丸组织发育阶段特异性;免疫组化实验结果显示,rDJL的表达具有精子发生周期的阶段特异性;免疫荧光分析结果显示,该蛋白在成熟精子位于顶体区;运用细胞免疫荧光和激光共聚焦显微技术及免疫共沉淀技术,初步确定rDJL蛋白能够与网格蛋白(clathrin)相互作用,参与网格蛋白复合体介导的内吞作用。rDJL蛋白的功能与精子发生中的内吞和顶体形成密切相关,阐明其功能对了解生殖细胞的发生机理、研制抗生育药物具有重要意义。

    YWK-II蛋白/APLP2作为MIS的新受体及其介导的信号传导通路

    公开(公告)号:CN1667415A

    公开(公告)日:2005-09-14

    申请号:CN200410004792.6

    申请日:2004-03-11

    Abstract: 本发明为发现YWK-II蛋白/APLP2作为MIS的新受体及其介导的信号传导通路,涉及蛋白质新功能的研究与应用领域。内容包括:体外共洗脱实验验证了两种蛋白质的相互作用;构建表达EGFP-YWK-II蛋白/APLP2的真核表达质粒,转染CHO细胞,荧光和免疫荧光观察显示,表达的重组蛋白定位于细胞膜上;筛选稳定表达EGFP-YWK-II蛋白/APLP2的CHO细胞系,发现MIS促进该细胞系的增殖;MIS通过与YWK-II蛋白/APLP2相互作用激活细胞ERK1/2,这一作用是通过Go蛋白实现的,Go1和Go2功能相似,其中主要经Goβγ介导,分别激活Ras和PKC,最终导致ERK1/2激活。发现YWK-II蛋白/APLP2与MIS的受体配体关系对于了解MIS促进精子存活力和活动力功能的分子机制以及YWK-II蛋白/APLP2与MIS的功能多态性有重要意义,为在精子冷冻技术中采用MIS作为精子的保护剂提供实验依据。

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