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公开(公告)号：CN115094038A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210839520.6
申请日：2022-07-15
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明涉及一种角膜基质细胞原代培养的方法，步骤如下：将患者的角膜微透镜取下后进行处理、转运、保存；用无菌PBS平衡盐溶液冲洗角膜微透镜；然后剪切成小块，加入胶原酶I溶液中，置于恒温摇床中消化；接着将消化后的角膜基质组织悬液离心，弃上清液；将沉淀使用角膜基质细胞培养液重悬，接着常规接种于细胞培养板或细胞培养瓶中；在温度为37℃的培养箱中培养；当细胞密度达到70%时，吸弃培养基，用PBS溶液冲洗，然后滴加0.25%（m/v）胰蛋白酶‑EDTA溶液，消化，加入角膜基质细胞培养液终止消化，吹打分散细胞，即获得角膜基质细胞。该方法的组织来源新鲜，细胞活性较高，保证了培养的基质细胞能够真实反应在体状态。
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