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公开(公告)号：CN113046291B
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202110181753.7
申请日：2021-02-09
Applicant: 安阳工学院 , 中国农业科学院棉花研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及一种用于单细胞转录组测序的亚洲棉根尖细胞与叶肉细胞原生质体的解离方法，该方法包括亚洲棉种子的萌发、组织培养、酶解解离原生质体、离心收集原生质体以及显微观察鉴定等步骤。本发明从亚洲棉的根尖和叶片所解离的原生质体浓度较高(高于3000cells/μL)，且活率不低于92％，完全符合10×Genomics单细胞转录组测序的上机要求。因此本发明得出的根尖与叶片解离原生质体的方法，更好的解决了亚洲棉根尖细胞与叶肉细胞原生质体解离困难以及活率低的难题，从而可以更好的研究棉花抗逆过程特定基因的表达，对于棉花的遗传发育与培育抗逆棉花的品种至关重要。
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公开(公告)号：CN115927548A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210911280.6
申请日：2022-07-29
Applicant: 安阳工学院 , 中国农业科学院棉花研究所
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/6806 , A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种用于亚洲棉根尖基因定位研究的RNA原位杂交方法。首先，根据亚洲棉幼根的稚嫩特性，改进了植物组织培养、取材、固定与脱水等方法，更加完善的保证了组织目标部位的结构完整性；其次，为进一步探索并优化一种适合亚洲棉根尖基因定位的RNA原位杂交方法，对切片的制备、切片预处理、预杂交、杂交以及杂交后处理等方面都进行了改进，从而可以保证亚洲棉根尖特异基因定位的准确性、特异性以及高效性，更加适合应用到亚洲棉根尖单细胞转录组测序的标记基因定位中去。本发明提供的RNA原位杂交方法是首次运用到棉花根尖基因定位的RNA原位杂交方法，具有很大的创新性与适用性。
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公开(公告)号：CN114907463A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210515337.0
申请日：2022-05-11
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/81 , G01N33/68
Abstract: 本发明中公开了瑟伯氏棉基因GthCBF4互作蛋白，包括SRC2、RD22、GAPC2和FBA2。本发明同时提供上述瑟伯氏棉基因GthCBF4互作蛋白的筛选方法，构建瑟伯氏棉基因GthCBF4的诱饵表达载体pGBKT7‑GthCBF4，使用Mating筛库的方法，在酵母文库中进行瑟伯氏棉基因GthCBF4互作蛋白的筛选。本发明将高通量测序应用于酵母双杂交技术，使用Mating筛库的方法，在酵母文库中进行了互作蛋白的筛选，筛选出能够与GthCBF4相互作用的蛋白SRC2、RD22、GAPC2，具有参与非生物胁迫、响应激素调节、抑制叶绿素降解、参与蛋白质泛素化过程、转移酶活性以及氧化还原酶活性等生物功能，为深入研究瑟伯氏棉GthCBF4参与胁迫响应的分子调控网络及其作用机制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109526659A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811391104.4
申请日：2018-11-20
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
IPC: A01G22/50
Abstract: 本发明属于农作物育苗技术领域，公开了一种棉花简易泥块育苗方法，浸种催芽，将棉花脱绒种子置于55℃左右的热水中浸种30分钟，室内催芽24小时左右；制作泥块，园土浇水和成浓泥浆，铺入苗床并抹平，待泥浆稍干，划成5cm×5cm大小的泥块；播种育苗，催芽结束后手指在小泥块中央点穴播种，覆盖细土；出苗移栽，待棉苗的子叶平展即可切泥块移栽即可，无需炼苗。本发明提供的棉花简易泥块育苗方法，该方法简单易操作，就地取材，成本极低，提早出苗移栽，育苗移栽后成活率高；育苗环境跟田间相似，移栽不伤根，缓苗时间短，成活率高，有很好的应用推广价值。
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公开(公告)号：CN106069696A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610530778.2
申请日：2016-07-07
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
Abstract: 本发明涉及植物抗逆形态学及生理学领域，具体涉及半野生棉苗期次生盐碱抗性鉴定的方法。所述方法包括步骤：种子准备；种子发芽；移苗水培；胁迫处理；性状调查；抗性评价。本发明首次在室内鉴定苗期半野生棉的次生盐碱抗性，且鉴定不受季节限制，不受外界气候的影响；鉴定周期短，大田棉花苗期耐盐鉴定50d左右，而室内水培鉴定仅需25d左右。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105917791A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610327954.2
申请日：2016-05-18
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
IPC: A01C1/00
CPC classification number: A01C1/00
Abstract: 本发明涉及棉花种植领域，具体涉及棉花种子快速去壳方法。所述方法包括步骤：成熟种子的选择；浸泡处理，将挑选的种子浸入30℃温水中，恒温水浴4h；剥壳；全干燥后保存备用。剥壳后的种子出苗周期明显缩短。大大减少了机械损伤造成的子叶损伤。操作简单，成本低廉，无需借助脱壳机器、刀片等工具，徒手即可完成剥壳，易于掌握和推广利用。
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公开(公告)号：CN104313138B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410534116.3
申请日：2014-10-11
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于分子细胞遗传学领域，具体涉及一种FISH制片再次杂交的方法。该方法主要包括以下步骤：制片在首次荧光原位杂交后，浸泡于2×SSC中以洗掉盖片，然后在2×SSC中浸泡3×5min；随后把制片放入90℃的2×SSC中10min，期间不断摇动；再放入78℃的70％去离子甲酰胺中4min，期间不断摇动；随后迅速放入-20℃的70％酒精中。该过程可把杂交信号洗脱掉，随后观测制片，检测不到杂交信号。处理后的制片再次用相同的探针进行荧光原位杂交实验，在染色体的相同位置可再次检测到杂交信号。本发明所述的方法使得原位杂交后的制片可重复多次使用，有效得节约了资源，降低了成本，减少了对环境的污染。
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公开(公告)号：CN104212888B
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201410409161.6
申请日：2014-08-19
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所 , 安阳工学院 , 河北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于分子细胞遗传学领域，具体涉及一种特异性标记棉花A genome和A sub-genome染色体端部的方法。用来源于海岛棉pima-90BAC文库的BAC克隆350B21，在不同棉种的有丝分裂中期染色体上进行BAC-FISH，发现在A genome和A sub-genome所有染色体的端部有较强烈杂交信号，而在D genome和D sub-genome所有染色体上杂交信号不明显。利用本发明的BAC克隆采用BAC-FISH方法，可快速有效标记棉花A genome和A sub-genome染色体端部。
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公开(公告)号：CN105519367A
公开(公告)日：2016-04-27
申请号：CN201610063497.0
申请日：2016-01-28
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
IPC: A01G7/00
CPC classification number: A01G7/00
Abstract: 本发明属于植物生理学，具体地，涉及野生棉苗期耐低温鉴定方法。所述方法包括步骤1)种子硫酸脱绒和切口处理；2)催芽处理；3)培养幼苗，选择3-5叶期长势一致的棉花幼苗；4)选择更接近自然条件的低温胁迫处理，5)根据棉花幼苗的受害情况进行评分，对野生棉的抗性水平进行分级。该方法选择在对低温最敏感的幼苗期进行严苛的低温胁迫处理，以期筛选到真正具有较高抗性水平的耐低温棉花材料；而且根据棉花叶片受害情况进行评分，客观分级，极大降低了人为因素造成的误差。该方法不受季节限制，随可进行大批量材料的鉴定，易于推广和利用。
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公开(公告)号：CN104630378A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510099093.2
申请日：2015-03-06
Applicant: 中国农业科学院棉花研究所
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/6841 , C12Q2561/101
Abstract: 本发明属于分子细胞遗传学领域，具体涉及棉属AD或ADE背景下同时鉴别各亚组全套染色体的BAC-FISH方法。所述方法包括用来源于阿非利加棉BAC文库的BAC克隆57I23在不同棉种中进行BAC-FISH的步骤，可同时明显分辨棉花AD基因组及A、D亚基因组染色体。以该BAC-DNA做探针，杂交信号在棉属5个四倍体中覆盖A亚组全部染色体端部以外的大部分区域，及D亚组全部染色体近中部小部分区域；在陆地棉与E组司笃克氏棉(E1)杂交的异源六倍体杂种AADDEE中，杂交信号与四倍体类似，明显与E亚组(无信号)区分开来，即实现了A、D、E三套亚组染色体的同时鉴别。利用本发明的BAC克隆采用BAC-FISH方法，可以在棉属AD或ADE背景下同时鉴别各亚组全套染色体。
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