公开(公告)号：CN110484540B

公开(公告)日：2022-11-29

申请号：CN201910866354.7

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 韩凌霞 ,  王兴童 ,  陈洪岩 ,  张伟 ,  于海波 ,  周宇

IPC: C12N15/12 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了鸭uaa基因及其在MHC单倍型选育中的应用。本发明分离获得4个鸭TAP单倍型的uaa CDS序列，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过测序和生物信息学分析进一步确定了鸭tap1、tap2、uaa基因紧密连锁，即TAP单倍型能代表MHC单倍型。本发明所分离的鸭uaa CDS序列能够作为分子标记应用于选育MHCI、tap1和tap2均分别达到纯合的鸭品系或者直接应用于全部鸭MHC区域单倍型的选育。

公开(公告)号：CN110484540A

公开(公告)日：2019-11-22

申请号：CN201910866354.7

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 韩凌霞 ,  王兴童 ,  陈洪岩 ,  张伟 ,  于海波 ,  周宇

IPC: C12N15/12 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了鸭uaa基因及其在MHC单倍型选育中的应用。本发明分离获得4个鸭TAP单倍型的uaa CDS序列，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过测序和生物信息学分析进一步确定了鸭tap1、tap2、uaa基因紧密连锁，即TAP单倍型能代表MHC单倍型。本发明所分离的鸭uaa CDS序列能够作为分子标记应用于选育MHCI、tap1和tap2均分别达到纯合的鸭品系或者直接应用于全部鸭MHC区域单倍型的选育。

公开(公告)号：CN110564697B

公开(公告)日：2022-11-29

申请号：CN201910867234.9

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 韩凌霞 ,  佟相慧 ,  陈洪岩

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/28 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了鸭MHCI类分子单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将MHC I类分子uaa基因α2和α3保守区域片段进行原核表达，将所表达的蛋白产物纯化后作为免疫原采用细胞融合技术制备融合细胞，通过IFA筛选共获得5株IFA阳性杂交瘤细胞；利用DuLMSC细胞表面表达MHC I类分子的性质，采用流式细胞术比较各单抗的亲和力，结果发现G1株检测到的阳性DuLMSC细胞数最高，因此将G1株所分泌的单抗作为鸭MHC I类分子的单克隆抗体。通过各种常规的免疫学方法，本发明所提供的MHCI类分子单克隆抗体能够应用于检测鸭细胞表面的MHC I类分子或MHC I类分子表达量的变化。

公开(公告)号：CN111849875A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010760981.5

申请日：2020-07-31

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 韩凌霞 ,  佟相慧 ,  陈洪岩

IPC: C12N5/0735 ,  C12N5/0775 ,  C12N1/10 ,  C12N7/00 ,  C12N7/02 ,  C12R1/91 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明公开了鸭瘟病毒易感型MHC单倍体无特定病原体鸭源胚肝间充质干细胞系及其应用。本发明利用四个单倍型鸭生产的11日龄鸭胚在添加碱性成纤维细胞生长因子、白血病抑制因子和干细胞因子同时培养的基础上成功构建得到具有干细胞分化能力、性能稳定的胚肝源的间充质干细胞系。针对细胞系的特征性病变观察表明，所构建的干细胞系能支持DEV复制。本发明进一步将DEV分别接种于所获得的细胞系最终筛选得到更适合DEV增殖的细胞系，其微生物保藏编号是CGMCC No.18304。本发明所构建的鸭胚肝间充质干细胞系本身无病原学潜在污染、遗传背景清晰、性能稳定，适合DEV的增殖和培养，能应用于商业化的鸭瘟病毒的增殖和培养。

公开(公告)号：CN110564697A

公开(公告)日：2019-12-13

申请号：CN201910867234.9

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 韩凌霞 ,  佟相慧 ,  陈洪岩

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/28 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了鸭MHCI类分子单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将MHC I类分子uaa基因α2和α3保守区域片段进行原核表达，将所表达的蛋白产物纯化后作为免疫原采用细胞融合技术制备融合细胞，通过IFA筛选共获得5株IFA阳性杂交瘤细胞；利用DuLMSC细胞表面表达MHC I类分子的性质，采用流式细胞术比较各单抗的亲和力，结果发现G1株检测到的阳性DuLMSC细胞数最高，因此将G1株所分泌的单抗作为鸭MHC I类分子的单克隆抗体。通过各种常规的免疫学方法，本发明所提供的MHCI类分子单克隆抗体能够应用于检测鸭细胞表面的MHC I类分子或MHC I类分子表达量的变化。