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公开(公告)号:CN116814519A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202311091228.1
申请日:2023-08-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种利用蔗糖生产肌醇的大肠杆菌工程菌株、及其构建方法和应用。本发明通过在大肠杆菌中过表达内源和外源的肌醇合成关键酶基因,建立肌醇合成途径;敲除葡萄糖‑6‑磷酸异构酶基因和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶基因,阻断竞争途径,增加肌醇合成途径碳通量供给;过表达葡萄糖转运和代谢的关键酶基因,提高葡萄糖利用能力,提高肌醇转化率;过表达蔗糖转运、分解和代谢的关键酶基因,在大肠杆菌中建立蔗糖代谢途径,平衡细胞生长和肌醇合成间碳流量的分配,实现蔗糖到肌醇的高效生产。在优化的高密度发酵条件下,利用以蔗糖为碳源的发酵培养基生产肌醇,肌醇的最高产量达到166.4 g/L。
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公开(公告)号:CN116814519B
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN202311091228.1
申请日:2023-08-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种利用蔗糖生产肌醇的大肠杆菌工程菌株、及其构建方法和应用。本发明通过在大肠杆菌中过表达内源和外源的肌醇合成关键酶基因,建立肌醇合成途径;敲除葡萄糖‑6‑磷酸异构酶基因和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶基因,阻断竞争途径,增加肌醇合成途径碳通量供给;过表达葡萄糖转运和代谢的关键酶基因,提高葡萄糖利用能力,提高肌醇转化率;过表达蔗糖转运、分解和代谢的关键酶基因,在大肠杆菌中建立蔗糖代谢途径,平衡细胞生长和肌醇合成间碳流量的分配,实现蔗糖到肌醇的高效生产。在优化的高密度发酵条件下,利用以蔗糖为碳源的发酵培养基生产肌醇,肌醇的最高产量达到166.4 g/L。
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