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公开(公告)号：CN118853722B
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202411365012.4
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请涉及工程菌株领域，具体涉及一种基于甲基苹果酸途径提高合成L‑异亮氨酸产量的方法及工程菌株。所述方法包括以下步骤：过表达甲基苹果酸合酶基因；表达羧酸的转运蛋白DcuD、DauA或DcuA编码基因。本发明确定羧酸转运蛋白DcuD、DauA、DcuA具有甲基苹果酸吸收蛋白功能，能够有效解除工程菌株发酵时葡萄糖对甲基苹果酸利用的抑制作用，显著提高基于甲基苹果酸途径的L‑异亮氨酸合成能力。
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公开(公告)号：CN112961792B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110537610.5
申请日：2021-05-18
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种生产肌醇的毕赤酵母工程菌及发酵方法。本发明通过在毕赤酵母中过表达内源和外源的肌醇合成关键酶基因，并敲除肌醇转运蛋白基因，提升毕赤酵母积累肌醇的能力；通过敲除果糖‑6‑磷酸激酶2（Pfk2）基因，并利用甘油诱导启动子调控表达葡萄糖‑6‑磷酸异构酶（Pgi）基因、果糖‑6‑磷酸激酶1（Pfk1）基因和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶（Zwf）基因，实现在以葡萄糖为碳源时弱化糖酵解和磷酸戊糖途径的目的，从而提高肌醇合成前体物葡萄糖‑6‑磷酸的供给。在高密度发酵中，利用甘油和葡萄糖在培养基中的添加时间来控制菌体生长及肌醇的生产，大大提高了毕赤酵母工程菌株肌醇的生产能力。
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公开(公告)号：CN112961792A
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN202110537610.5
申请日：2021-05-18
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种生产肌醇的毕赤酵母工程菌及发酵方法。本发明通过在毕赤酵母中过表达内源和外源的肌醇合成关键酶基因，并敲除肌醇转运蛋白基因，提升毕赤酵母积累肌醇的能力；通过敲除果糖‑6‑磷酸激酶2（Pfk2）基因，并利用甘油诱导启动子调控表达葡萄糖‑6‑磷酸异构酶（Pgi）基因、果糖‑6‑磷酸激酶1（Pfk1）基因和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶（Zwf）基因，实现在以葡萄糖为碳源时弱化糖酵解和磷酸戊糖途径的目的，从而提高肌醇合成前体物葡萄糖‑6‑磷酸的供给。在高密度发酵中，利用甘油和葡萄糖在培养基中的添加时间来控制菌体生长及肌醇的生产，大大提高了毕赤酵母工程菌株肌醇的生产能力。
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公开(公告)号：CN118853722A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411365012.4
申请日：2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请涉及工程菌株领域，具体涉及一种基于甲基苹果酸途径提高合成L‑异亮氨酸产量的方法及工程菌株。所述方法包括以下步骤：过表达甲基苹果酸合酶基因；表达羧酸的转运蛋白DcuD、DauA或DcuA编码基因。本发明确定羧酸转运蛋白DcuD、DauA、DcuA具有甲基苹果酸吸收蛋白功能，能够有效解除工程菌株发酵时葡萄糖对甲基苹果酸利用的抑制作用，显著提高基于甲基苹果酸途径的L‑异亮氨酸合成能力。
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