公开(公告)号：CN113189231A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110461059.0

申请日：2021-04-27

Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

Inventor： 李耘 ,  刘哲 ,  刘畅 ,  李金娟 ,  赵海晴

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/30 ,  G01N30/32 ,  G01N30/34 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种测定食品中14种杂环胺含量的方法；首先对食品进行前处理得待检样品，然后采用液相色谱质谱联用仪对待检样品进行分析检测后进行数据处理得出食品中杂环胺的含量。本发明可以实现对非油炸食品及杂环胺含量较多的油炸食品中14种杂环胺的同步定性及定量检测，检出限低于0.02ng/mL，灵敏度良好。

公开(公告)号：CN110951692A

公开(公告)日：2020-04-03

申请号：CN201911221278.0

申请日：2019-12-03

Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

Inventor： 李耘 ,  刘畅 ,  钱永忠 ,  邱静 ,  任亚林 ,  李金娟

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株，选用Hela细胞，转染带有绿色荧光蛋白标签的糖皮质激素受体，通过抗生素筛选，获得稳定转染GFP-GR的Hela细胞株。还公开了该转基因细胞株的测定方法，包括：步骤1：根据糖皮质激素及其受体的作用机制，构建糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株；步骤2：通过给药转基因细胞株，定量检测该细胞株在细胞质区域向细胞核区域移动的比率。该方法细胞受试载体可无限扩增使用，无额外损耗费用；通过高内涵筛选技术，可实现多个样本同步检测，具有成本低廉、通量极高、灵敏度较高的特点。该方法可在活体层面用于乳品、污水、养殖动物尿液等糖皮质素EDCs的检测。

公开(公告)号：CN113252913A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202110499552.1

申请日：2021-05-08

Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 ,  石家庄君乐宝乳业有限公司

Inventor： 李耘 ,  张耀广 ,  柴艳兵 ,  钱永忠 ,  邱静 ,  李兴佳 ,  刘畅 ,  卢曼慧

IPC: G01N33/74

Abstract: 本发明公开一种乳品中糖皮质激素类混合物的转基因细胞测定方法，属于生物领域。具体方案基于自建Hela‑GFP‑GR转基因工程细胞系，配套并兼容乳品样本前处理方法及预测模型，构建针对液态乳、乳粉中糖皮质激素类混合物筛查的系统解决方案；该细胞系携带荧光蛋白的GR结合乳品中糖皮质激素类混合物并从细胞质迁移至细胞核区域，通过该过程中质到核转移比率可定性和半定量计算糖皮质激素浓度水平，并同阴性、阳性对照一起可判断糖皮质激素类物质的阳性率及范围。该方法通量极高，可总体识别乳品中内源性及外源性糖皮质激素类混合物的总量，真正意义上实现该类污染物诱导风险的总体防控，是实现乳品中糖皮质激素混合物风险内控非常高效且广谱的筛查方法。

公开(公告)号：CN111500545A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN202010362024.7

申请日：2020-04-30

Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

Inventor： 李耘 ,  刘畅 ,  钱永忠 ,  邱静 ,  任亚林 ,  李金娟

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/62 ,  G01N33/74

Abstract: 本发明公开了一种转基因工程细胞株以及基于该细胞株测定糖皮质激素类混合物的方法，该细胞株通过慢病毒感染方式，将绿色荧光蛋白GFP和糖皮质激素受体GR融合蛋白基因整合入Hela细胞染色体中，通过嘌呤霉素puro筛选，最终获取稳定表达GFP-GR的Hela细胞株。基于稳定表达GFP-GR的Hela细胞株，通过测定GFP-GR结合激素配体从细胞质区域迁移至细胞核区域的迁移比率，可高通量、低成本、快速检测不同样品中的糖皮质激素类混合物的阳性检出率，以地塞米松计灵敏度可达10-9mol/L，可通过对环境及食品中糖皮质激素类混合物含量的快速筛查，明确危害程度，指导风险防控。

公开(公告)号：CN110951692B

公开(公告)日：2020-12-18

申请号：CN201911221278.0

申请日：2019-12-03

Applicant: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

Inventor： 李耘 ,  刘畅 ,  钱永忠 ,  邱静 ,  任亚林 ,  李金娟

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株，选用Hela细胞，转染带有绿色荧光蛋白标签的糖皮质激素受体，通过抗生素筛选，获得稳定转染GFP‑GR的Hela细胞株。还公开了该转基因细胞株的测定方法，包括：步骤1：根据糖皮质激素及其受体的作用机制，构建糖皮质激素内分泌干扰联合效应的转基因细胞株；步骤2：通过给药转基因细胞株，定量检测该细胞株在细胞质区域向细胞核区域移动的比率。该方法细胞受试载体可无限扩增使用，无额外损耗费用；通过高内涵筛选技术，可实现多个样本同步检测，具有成本低廉、通量极高、灵敏度较高的特点。该方法可在活体层面用于乳品、污水、养殖动物尿液等糖皮质素EDCs的检测。