公开(公告)号：CN107653243A

公开(公告)日：2018-02-02

申请号：CN201711129996.6

申请日：2017-11-15

Applicant: 中国农业科学院农业基因组研究所

Inventor： 张艳 ,  江帆 ,  樊伟 ,  刘博 ,  李书曲 ,  王恒超 ,  刘聪辉 ,  任钰为 ,  尹丽娟

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1006 ,  C12Q2563/149

Abstract: 本发明公开了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法。本发明提供了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法，包括如下步骤：1)将动物肠道内容物或粪便经过差速离心；2)将所述微生物细胞结合使用液氮反复冻融裂解法、玻璃珠研磨法和裂解液高温裂解法进行细胞破碎，得到破碎后细胞；3)先提取所述破碎后细胞的基因组DNA，再纯化所述基因组DNA。本发明添加了微生物细胞的洗涤和富集步骤，降低了宿主和食物DNA的污染；组合多种微生物细胞裂解破碎的方法，降低宏基因组DNA的物种偏好性；增加纯化的步骤，保证DNA的纯度，可以满足构建第二代高通量测序文库的DNA要求。

公开(公告)号：CN107653243B

公开(公告)日：2021-06-15

申请号：CN201711129996.6

申请日：2017-11-15

Applicant: 中国农业科学院农业基因组研究所

Inventor： 张艳 ,  江帆 ,  樊伟 ,  刘博 ,  李书曲 ,  王恒超 ,  刘聪辉 ,  任钰为 ,  尹丽娟

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法。本发明提供了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法，包括如下步骤：1)将动物肠道内容物或粪便经过差速离心；2)将所述微生物细胞结合使用液氮反复冻融裂解法、玻璃珠研磨法和裂解液高温裂解法进行细胞破碎，得到破碎后细胞；3)先提取所述破碎后细胞的基因组DNA，再纯化所述基因组DNA。本发明添加了微生物细胞的洗涤和富集步骤，降低了宿主和食物DNA的污染；组合多种微生物细胞裂解破碎的方法，降低宏基因组DNA的物种偏好性；增加纯化的步骤，保证DNA的纯度，可以满足构建第二代高通量测序文库的DNA要求。