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公开(公告)号:CN116064425A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211611788.0
申请日:2022-12-14
Applicant: 中国农业科学院都市农业研究所 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/38 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒基因工程技术领域,公开了TK基因缺失的重组猪伪狂犬病毒(PRV)的感染性克隆系统,所述感染性克隆系统包括5个Fosmid,分别为Fos‑Bartha‑1、Fos‑Bartha‑2‑dTK、Fos‑Bartha‑3‑dTK、Fos‑Bartha‑4和Fos‑Bartha‑5,其中Fos‑Bartha‑2‑dTK和Fos‑Bartha‑3‑dTK是通过将Fos‑Bartha‑2和Fos‑Bartha‑3中的TK基因缺失得来。利用本发明的TK基因缺失多片段感染性克隆系统构建重组PRV效率高、对小鼠无致病性,为今后的PRV Bartha‑K61疫苗载体及基因工程载体研究奠定了重要基础。
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公开(公告)号:CN114236128B
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202111449947.7
申请日:2021-11-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C07K14/165 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白抗体的阻断ELISA试剂盒。该试剂盒包括:包被有猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白的酶标板、HRP标记的鼠抗猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白单克隆抗体、阳性血清对照、阴性血清对照。该试剂盒最低能检出1:512稀释的阳性血清,并且与PEDV、TGEV和PDCoV等阳性血清无交叉反应,批内和批间重复变异系数小于10%。与间接免疫荧光试验的对比结果显示,本发明阻断ELISA试剂盒检测的符合率为99.6%,Kappa值为0.91,本发明建立的阻断ELISA方法与IFA高度一致。该方法操作简便、快速,可用于检测猪急性腹泻综合征冠状病毒抗体临床样本。
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公开(公告)号:CN114287389A
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN202111534568.8
申请日:2021-12-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: A01K67/027 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型构建方法及其应用。该方法采用颅内注射方式将猪急性腹泻综合征病毒感染7日龄以内小鼠,得到猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型。采用本发明方法建立的SADS‑CoV感染小鼠模型,攻毒后实验小鼠临床症状清晰、典型、可重复性高,与新生猪感染的临床症状一致,可用于SADS‑CoV相关疾病的致病机制和免疫机理研究,以及抗病毒药物和疫苗的研发,有助于防控SADS‑CoV引起的疾病。
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公开(公告)号:CN114088941A
公开(公告)日:2022-02-25
申请号:CN202111183767.9
申请日:2021-10-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒。本发明的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的双抗夹心ELISA试剂盒,包括:包被有兔抗SADS‑CoV N蛋白多克隆抗体的酶标板、HRP标记的鼠抗SADS‑CoV N蛋白单克隆抗体。还包括酶标二抗、封闭液、稀释液、洗涤液、显色液以及终止液。本发明所建立的双抗体夹心ELISA试剂盒具有较好的特异性、敏感性、批内和批间重复性。该试剂盒最低病毒的检出量为10‑4.42TCID50/0.1mL,并且不与PEDV、TGEV和PDCoV反生反应,批内和批间重复变异系数小于10%。与RT‑PCR方法比较,本发明双抗夹心ELISA试剂盒检测的符合率为93.93%。本发明所建立的SADS‑CoV抗原双抗体夹心ELISA检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,能用于SADS‑CoV的临床检测。
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公开(公告)号:CN117384278B
公开(公告)日:2025-02-07
申请号:CN202311124299.7
申请日:2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体3F1及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASF VP72蛋白的中和活性单克隆抗体3F1,在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能,对抗原亲和力强,可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号:CN117209595B
公开(公告)日:2024-11-08
申请号:CN202311124298.2
申请日:2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体4F10及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体(4F10),在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能,对抗原亲和力强,可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号:CN113956353A
公开(公告)日:2022-01-21
申请号:CN202111182911.7
申请日:2021-10-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS‑CoV)N蛋白单克隆抗体。本发明将全长N蛋白基因克隆至pET32a载体中,构建出原核表达重组质粒pET32a‑N,通过诱导表达、蛋白纯化获得纯化的N蛋白。将纯化的N蛋白免疫Balb/c小鼠,随后取免疫鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,筛选获得两个抗N蛋白的单克隆抗体,分别命名为4B10和6E8。通过截短表达,发现该抗体能特异性识别并结合N蛋白的N端区域,4B10和6E8识别区域是64~84aa。本发明提供的上述单克隆抗体,可利用基因工程或蛋白质工程方法获得。该抗体能特异性识别SADS‑CoV,对病毒还具有中和活性,为探究SADS‑CoV致病机制的研究、早期检测试剂盒和治疗性抗体的开发提供了新的原材料。
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公开(公告)号:CN117229392B
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202311124297.8
申请日:2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体5A8,在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能,对抗原亲和力强,可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号:CN117209596A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311124301.0
申请日:2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体2C9及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体2C9,2C9是一株构象依赖性单克隆抗体,在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能,对抗原亲和力强,可应用于抗病毒药物的研究。
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公开(公告)号:CN117209595A
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202311124298.2
申请日:2023-09-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体4F10及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体(4F10),在体外具有阻止ASFV感染敏感细胞的中和功能,对抗原亲和力强,可应用于抗病毒药物的研究。
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