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发明公开
一种用于弓形虫基因编辑的CRISPR/Cas9载体的构建方法无效

公开(公告)号：CN114150001A

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN202111308182.5

申请日：2021-11-05

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 陈兆国 , 程龙 , 米荣升 , 钱旻 , 龚海燕 , 黄燕

IPC: C12N15/30 , C12N15/70 , C12N15/66

Abstract: 本发明提供一种用于弓形虫基因编辑的CRISPR/Cas9载体的构建方法，属于分子生物技术领域。所述的方法包括如下步骤：设计合成两条单链DNA寡核苷酸，通过退火反应形成双链寡核苷酸；利用T4DNA连接酶将双链寡核苷酸连接到经BaeⅠ限制性核酸内切酶酶切的载体，转化大肠杆菌DH5α株感受态细胞，挑取单克隆培养后测序验证，即可得到用于弓形虫基因编辑的CRISPR/Cas9质粒。将此方法用于构建弓形虫蛋白基因编辑虫种具有快速、高效、低成本等特点。

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