公开(公告)号：CN118909954A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411230974.9

申请日：2024-09-04

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 孙英杰 ,  赵飞杨 ,  丁铲 ,  刘忠媛 ,  宋翠萍 ,  谭磊 ,  仇旭升 ,  廖瑛 ,  屈阳 ,  唐宁

IPC: C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  C12R1/91 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种稳定表达人源TMEM135基因的MDCK细胞系及其构建方法和应用，所述细胞株为犬肾细胞MDCK‑homoTMEM135，其培养物保藏编号为:CCTCC NO：C2024260，所述MDCK细胞系中含有人源TMEM135基因，可加快宿主细胞内胆固醇的转运，促进甲型流感病毒的内体逃逸，提高甲型流感病毒在感染宿主细胞后产生的病毒滴度。所述稳定表达人源TMEM135基因的MDCK细胞系的构建方法，通过先扩增人源TMEM135基因并构建稳表达载体，之后将所述稳表达载体与pxPAX2、pMD2G质粒共转染至293T细胞，孵育产生包装好的慢病毒；最后用包装好的慢病毒感染MDCK细胞后，进行嘌呤霉素药物筛选并扩大培养，即得所述稳定表达人源TMEM135基因的MDCK细胞系。