公开(公告)号：CN117004580A

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202310818303.3

申请日：2023-07-05

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 廖瑛 ,  翁文莲 ,  方守国 ,  丁铲 ,  孟春春 ,  谭磊 ,  孙英杰 ,  仇旭升 ,  宋翠萍

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/50 ,  C12N15/85 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一株QX样传染性支气管炎病毒rH120‑QX(mS)的反向遗传操作方法和应用。首先构建涵盖H120毒株全基因组五个质粒和QX样传染性支气管炎病毒S基因质粒，再对QX S基因质粒突变成为含有Furin‑S2'酶切位点。通过体外连接获得rH120‑QX(mS)全长cDNA，经体外转录成基因组RNA和N的转录本，一起电击转染到BHK‑21细胞。转染2天后收集上清接种到10日龄SPF鸡胚尿囊液中，获得重组毒株rH120‑QX(mS)。本发明提供了有效的反向遗传操作系统，且该重组病毒可作为研究S蛋白Furin‑S2'酶切位点对冠状病毒的组织嗜性和致病性的模式病毒。