公开(公告)号：CN115316339B

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202210481256.3

申请日：2022-05-05

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  王立凯 ,  李广栋

IPC: A61K31/4045 ,  A01K67/02

Abstract: 本发明公开了提高雌性家畜胎盘组织抗氧化能力和/或营养转运能力的方法，包括用褪黑素处理妊娠后期雌性家畜。本发明通过动物实验证明，利用褪黑素处理妊娠后期母猪，可提高母猪外周血和初乳中褪黑素浓度，同时提高胎盘组织的抗氧化能力和营养转运能力。本发明的方法简单有效，可行性强。

公开(公告)号：CN117164698A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202210582917.1

申请日：2022-05-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  阎来庆 ,  于海颖 ,  王立凯 ,  朱天奇 ,  马文奎 ,  武海新 ,  关盛宇 ,  马骁

IPC: C07K14/72 ,  C12N15/12 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及分离的猪(Sus scrofa)褪黑素受体MTNR1B蛋白，所述MTNR1B蛋白具有：如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；或，在如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸残基且能结合褪黑素的氨基酸序列。本发明还涉及所述MTNR1B蛋白的编码基因和应用。本发明的猪(Sus scrofa)褪黑素受体MTNR1B，可应用于猪的医学和畜牧生产中。

公开(公告)号：CN115735900A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211181970.7

申请日：2022-09-27

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  阎来庆 ,  廖晨星 ,  李广栋 ,  马文奎 ,  刘云洁 ,  姬鹏云 ,  刘雪凝 ,  赵萌萌 ,  郑启浩

IPC: A01N1/02

Abstract: 本发明公开了一种精液冷冻液及其应用。本发明的精液冷冻液包括褪黑素和N,N‑二甲基甲酰胺。本发明还公开了褪黑素在禽类动物的精液冷冻保存中的应用。采用本发明中的精液冷冻液可以显著提高解冻后精子活力活率、质膜完整性、顶体完整性等指标，降低精液ROS水平，改善精子线粒体膜电位水平，提高解冻后精液人工输精孵化率，可用于禽类精液冷冻保存、种质资源保存和利用等领域中。

公开(公告)号：CN115305256A

公开(公告)日：2022-11-08

申请号：CN202210636536.7

申请日：2022-06-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  王立凯 ,  吴昊 ,  马文奎 ,  关盛宇 ,  阎来庆 ,  张金龙 ,  何长久 ,  连正兴

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027 ,  C12N15/54

Abstract: 本发明公开了一种提高羊卵巢储备的方法，涉及将ASMT基因的编码序列连接到羊源卵巢特异表达GDF9基因启动子，构建卵巢特异过表达载体pGDF9‑ASMT，通过原核胚显微注射、胚胎移植获得转基因阳性后代。与野生型相比，阳性母羊卵巢拥有更多的卵泡。对于羊ASMT的功能、卵巢局部褪黑素信号转导、生殖生物学和家畜生产学等的研究具有重要科学意义，可为ASMT在提高羊繁殖效率中的应用与作用机制研究提供新的参考。

公开(公告)号：CN113186211A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110575590.0

申请日：2021-05-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  张鲁 ,  朱天奇 ,  王立凯 ,  关盛宇 ,  于海颖 ,  马骁 ,  阎来庆

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及分离的猪ASMT基因以及相应的表达载体和宿主细胞。本发明还涉及针对猪ASMT基因的特异性引物对和检测试剂盒。本发明明确了猪ASMT基因序列，为该基因相关的生物合成路径以及生理和病理方面的研究提供新的参考。

公开(公告)号：CN107778364A

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201710667231.1

申请日：2017-08-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  崔炜 ,  田秀芝 ,  姬鹏云 ,  吕东颖 ,  吴昊 ,  柴孟龙 ,  连正兴 ,  阿布力孜·吾斯曼

IPC: C07K14/705 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供一种影响羊早期胚胎发育的NLRP7基因及应用，NLRP7基因核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。该基因在雌性绵羊的卵巢组织中高表达，仅定位于卵泡内；本发明将NLRP7基因siRNA干扰片段和shRNA干扰质粒混合注射入成熟卵母细胞中，孤雌激活后发现NLRP7基因敲降后的胚胎出现了发育异常，这说明NLRP7是绵羊早期孤雌胚胎正常发育所需的关键基因，应用前景广阔。

公开(公告)号：CN115735900B

公开(公告)日：2025-03-07

申请号：CN202211181970.7

申请日：2022-09-27

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  阎来庆 ,  廖晨星 ,  李广栋 ,  马文奎 ,  刘云洁 ,  姬鹏云 ,  刘雪凝 ,  赵萌萌 ,  郑启浩

IPC: A01N1/122 ,  A01N1/125 ,  A01N1/126 ,  A01N1/162

Abstract: 本发明公开了一种精液冷冻液及其应用。本发明的精液冷冻液包括褪黑素和N,N‑二甲基甲酰胺。本发明还公开了褪黑素在禽类动物的精液冷冻保存中的应用。采用本发明中的精液冷冻液可以显著提高解冻后精子活力活率、质膜完整性、顶体完整性等指标，降低精液ROS水平，改善精子线粒体膜电位水平，提高解冻后精液人工输精孵化率，可用于禽类精液冷冻保存、种质资源保存和利用等领域中。

公开(公告)号：CN109735531B

公开(公告)日：2021-02-26

申请号：CN201811496751.1

申请日：2018-12-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  张鲁 ,  吕东颖 ,  姚昱君 ,  朱天奇 ,  姬鹏云 ,  连正兴 ,  韩红兵 ,  吴英杰

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/12 ,  C07K14/47

Abstract: 本发明公开了一种高GC含量基因的零背景克隆方法及其应用。本发明通过筛选设计引物，优化扩增体系，运用改良的Slow‑down PCR方法成功克隆出高GC含量的绵羊Kiss1基因的完整CDS区和部分5＇及3＇非翻译区序列并进行生物信息学分析。本发明提供的绵羊Kiss1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明克隆得到的绵羊Kiss1基因在研究抑制肿瘤转移和调控家畜生殖功能方面有广阔的应用前景。本发明为家畜Kisspeptin相关神经肽的研究提供了新的研究对象，本发明提供的克隆方法可以给其他高GC含量的基因克隆提供理论参考。

公开(公告)号：CN109868275A

公开(公告)日：2019-06-11

申请号：CN201910183972.1

申请日：2019-03-12

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  张鲁 ,  连正兴 ,  吕东颖 ,  姚昱君 ,  吴昊 ,  朱天奇 ,  姬鹏云

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供一种CRISPR/Cas9介导的羊FGF5基因敲除和定点整合MTNR1A基因的方法。将特异靶向羊FGF5基因第三外显子的CRISPR/Cas9打靶载体和基因同源重组载体共同转入羊胎儿成纤维细胞中，获得羊FGF5基因敲除且定点整合MTNR1A基因的细胞。本发明通过核转的方式将供体载体和打靶载体共转染羊胎儿成纤维细胞，通过Gibson Assembly方法构建的无标记供体载体中CYP17启动子可以使MTNR1A实现在羊卵巢组织中特异性表达。分离鉴定出的阳性单克隆细胞株可作为体细胞核移植的核供体获得克隆胚胎，进而为培育生殖系统局部强化褪黑素信号且多产毛的转基因克隆羊打下坚实基础。

公开(公告)号：CN109628447A

公开(公告)日：2019-04-16

申请号：CN201811496694.7

申请日：2018-12-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘国世 ,  李广栋 ,  张鲁 ,  连正兴 ,  吴英杰 ,  吕东颖 ,  姚昱君 ,  朱天奇 ,  姬鹏云 ,  杨明辉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90

CPC classification number: C12N15/113 ,  C12N15/8509 ,  C12N15/907 ,  C12N2310/10 ,  C12N2310/20 ,  C12N2800/107 ,  C12N2810/10

Abstract: 本发明提供了特异靶向羊友好位点H11的sgRNA及其编码DNA和应用。本发明的sgRNA序列如SEQ ID NO.1或2所示，转录所述sgRNA序列的DNA序列如SEQ ID NO.3或4所示。本发明的sgRNA能特异识别羊的H11位点，引导Cas9核酸内切酶对该位点进行高效切割，打靶效率在70％以上，能有效减少CRISPR/Cas9系统存在的脱靶现象，进而减少非特异性切割所引起的基因组非靶向位点的Indel带来的影响。基于本发明提供的sgRNA构建Cas9/sgRNA表达系统可实现在细胞或个体水平上对羊H11位点进行靶向修饰，用于研究相关时空特异性表达基因以及培育新品种基因编辑羊。