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公开(公告)号:CN103290004B
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201310199086.0
申请日:2013-05-24
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/68 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种检测奶牛乳房炎抗性的DNA甲基化的分子标记及其引物对。根据所述分子标记设计的扩增引物对和测序引物对,可对奶牛乳房炎抗性的DNA甲基化进行检测。所述检测的方法为:将待测奶牛的基因组DNA经过重亚硫酸盐处理,利用扩增引物对进行CD4基因的PCR扩增,再利用测序引物对配合焦磷酸仪进行测序,即可检测待测奶牛的CD4基因启动子区的甲基化程度。本发明为培育具乳房炎抗性的奶牛分子育种提供理论依据和遗传基础。
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公开(公告)号:CN102533994B
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201110457936.3
申请日:2011-12-30
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种西门塔尔牛蜘蛛腿综合征致病位点荧光自动化检测分析方法,PCR扩增用引物,其核苷酸序列如下:5’-CTGAGTCTCCTCTTCTGTTTTCA-3’,5’-GTTGGCATCTGAGTCCAGGT-3’。本发明利用荧光标记引物PCR扩增和电泳分型技术,对西门塔尔牛AS致病位点进行分型的试剂盒结果稳定,成本低,准确可靠,对西门塔尔牛AS致病位点可以进行准确的分型。
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公开(公告)号:CN102002527B
公开(公告)日:2012-12-12
申请号:CN201010547546.0
申请日:2010-11-16
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种能够准确高效地检测CD18基因D128G突变位点的引物和特异性的TaqMan MGB探针,利用这些引物和探针,采用实时荧光定量PCR技术,能够快速灵敏地检测待测牛CD18 D128G突变位点基因型,从而准确筛查BLAD遗传缺陷携带者。与传统的检测技术相比具有诸多优点,包括检测速度快,灵敏度高,自动化程度高,而且经过一个PCR反应即可判型,反应全过程在封闭的管内进行,减少了交叉污染。
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公开(公告)号:CN101812450B
公开(公告)日:2012-01-11
申请号:CN201010161235.0
申请日:2010-04-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法及其专用引物。所述专用引物:序列3和序列4所示DNA组成的引物对。所述引物对可用于辅助鉴定具有不同体重性状的鸡。所述方法:以待测鸡的基因组DNA为模板,用所述引物对进行PCR;如得到398bp PCR产物且没得到336bp PCR产物,鸡的基因型为AA;如得到336bp PCR产物且没得到398bp PCR产物,鸡的基因型为BB;如得到398bp和336bp两种PCR产物,鸡的基因型为AB;AA基因型鸡的体重在统计学上高于AB基因型鸡;AB基因型鸡的体重在统计学上高于BB基因型鸡。所述方法的优点如下:简便、快速、灵敏,结果可靠、稳定、准确,不需要特殊的仪器。
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公开(公告)号:CN102002527A
公开(公告)日:2011-04-06
申请号:CN201010547546.0
申请日:2010-11-16
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种能够准确高效地检测CD18基因D128G突变位点的引物和特异性的TaqMan MGB探针,利用这些引物和探针,采用实时荧光定量PCR技术,能够快速灵敏地检测待测牛CD18 D128G突变位点基因型,从而准确筛查BLAD遗传缺陷携带者。与传统的检测技术相比具有诸多优点,包括检测速度快,灵敏度高,自动化程度高,而且经过一个PCR反应即可判型,反应全过程在封闭的管内进行,减少了交叉污染。
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公开(公告)号:CN101812450A
公开(公告)日:2010-08-25
申请号:CN201010161235.0
申请日:2010-04-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了辅助鉴定具有不同体重性状鸡的方法及其专用引物。所述专用引物:序列3和序列4所示DNA组成的引物对。所述引物对可用于辅助鉴定具有不同体重性状的鸡。所述方法:以待测鸡的基因组DNA为模板,用所述引物对进行PCR;如得到398bp PCR产物且没得到336bp PCR产物,鸡的基因型为AA;如得到336bp PCR产物且没得到398bp PCR产物,鸡的基因型为BB;如得到398bp和336bp两种PCR产物,鸡的基因型为AB;AA基因型鸡的体重在统计学上高于AB基因型鸡;AB基因型鸡的体重在统计学上高于BB基因型鸡。所述方法的优点如下:简便、快速、灵敏,结果可靠、稳定、准确,不需要特殊的仪器。
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公开(公告)号:CN105158041B
公开(公告)日:2017-10-20
申请号:CN201510570829.X
申请日:2015-09-09
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N1/28 , G01N33/74 , G01N33/531
Abstract: 本发明提供了一种毛发皮质醇激素提取方法,所述方法包括以下步骤:步骤一:将毛发样品置于异丙醇中进行振荡洗涤后在68‑72℃干燥3.5‑4.5h获得洗涤后的毛发;步骤二:利用球磨仪对所述洗涤后的毛发进行研磨获得研磨后的毛发;步骤三:将研磨后的毛发与甲醇在75‑85℃接触15‑17h后离心获得上清液。利用本发明所提供的方法提高了皮质醇激素的提取量,更缩短了样品处理时间,提高了皮质醇提取效率。
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公开(公告)号:CN102776288B
公开(公告)日:2013-12-25
申请号:CN201210266722.2
申请日:2012-07-30
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测牛凝血因子XI基因第9外显子内15bp插入突变的试剂盒,该试剂盒中包括Seq ID No.1-4所示的引物组合。本发明基于15bp插入片段在牛凝血因子XI基因第9外显子中的位置,设计了跨越15bp插入片段区域的2对引物,并在此基础上建立了PCR检测体系。其中,第1对引物(Seq ID No.1和2)仅能特异扩增出野生型的等位基因;第2对引物(Seq ID No.3和4)仅能特异扩增出突变型等位基因;2个PCR产物长度相差94bp,利用低浓度的琼脂糖凝胶,经过较短时间电泳即能灵敏区分不同的基因型,从而准确筛查出遗传缺陷携带者。
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公开(公告)号:CN101705299B
公开(公告)日:2013-11-06
申请号:CN200910236820.X
申请日:2009-10-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛微卫星标记组合,其包括17个牛微卫星标记,同时提供了基于此17个微卫星标记的高效检测方法。这些标记多态性高、标记间不连锁并且片段大小间隔适当,易于同时检测。本发明在检测技术上加以改进,利用多标记复合扩增技术和荧光半自动微卫星分型方法,优化实验体系,建立了高通量、准确高效的17个牛微卫星标记复合扩增和基因分型方法。
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公开(公告)号:CN102586464B
公开(公告)日:2013-10-09
申请号:CN201210076915.1
申请日:2012-03-21
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种褐牛蜘蛛腿综合征致病位点PCR检测用引物,其核苷酸序列如下:5’-CTCAAGAGTCACCACGCAGAT-3’,5’-ATGGAGGGTGCCTTGTCGTC-3’。本发明还涉及PCR检测试剂盒及其检测方法和应用。本发明褐牛蜘蛛腿综合征致病位点PCR检测用引物及其试剂盒,检测结果稳定,成本低,准确可靠,可实现高通量检测,对褐牛AS致病位点可以进行准确的分型,能及时发现褐牛蜘蛛腿综合征携带者个体。
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