公开(公告)号：CN110684799A

公开(公告)日：2020-01-14

申请号：CN201910953813.5

申请日：2019-10-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李秋艳 ,  林如涛 ,  李志远 ,  郝海阳 ,  史文姝 ,  黄彤彤 ,  牛建芹 ,  李梦然

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/90

Abstract: 本发明提供一种乳腺特异性表达PEDV单链抗体基因的同源重组载体及应用。所述同源重组载体是以真核表达载体为骨架载体，同源重组载体中至少包括正筛选元件、负筛选标记基因、PEDV单链抗体基因表达盒以及rosa26基因的同源左臂和同源右臂；其中，正筛选元件包括顺次连接的重组酶识别序列-正筛选标记基因-重组酶基因-重组酶识别序列。利用所述同源重组载体转染哺乳动物体细胞，获得的阳性细胞rosa26基因第一个内含子定点整合PEDV单链抗体基因。利用本发明方法成功获得了乳腺特异性表达PEDV单链抗体的转基因猪细胞系，为通过转基因技术制备抗腹泻转基因猪奠定基础。

公开(公告)号：CN110564696B

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN201910840600.1

申请日：2019-09-06

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李秋艳 ,  史文姝 ,  赵兴波

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  A61K39/395 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种具有PEDV中和活性的单克隆抗体。本发明所提供的具有PEDV中和活性的单克隆抗体是由“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS‑②”分泌产生。所述“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS‑②”在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.18312。本发明通过制备具有PEDV中和活性的单克隆抗体，使新生仔猪口服该抗体，可有效减少仔猪的染病几率，并且在同居感染实验中保护率达到100％。结果表明，具有PEDV中和活性的单克隆抗体可有效提高新生仔猪体内的抗体含量，并降低患病风险，且该方法制备简单，操作方便，具有较大应用前景。

公开(公告)号：CN110863007A

公开(公告)日：2020-03-06

申请号：CN201910954117.6

申请日：2019-10-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李秋艳 ,  林如涛 ,  李志远 ,  郝海阳 ,  史文姝 ,  黄彤彤 ,  牛建芹 ,  李梦然

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供一种乳腺特异性表达抗菌肽Cecropin基因的同源重组载体及应用，所述同源重组载体是以真核表达载体为骨架载体，重组载体中至少包括正筛选元件、负筛选标记基因、抗菌肽Cecropin基因表达盒以及rosa26基因的同源左臂和同源右臂；其中，正筛选元件包括顺次连接的重组酶识别序列-正筛选标记基因-重组酶基因-重组酶识别序列。利用所述同源重组载体转染哺乳动物体细胞，获得的阳性细胞rosa26基因第一个内含子定点整合抗菌肽Cecropin基因。利用本发明方法成功获得了乳腺特异性表达抗菌肽Cecropin的转基因猪细胞系，为通过转基因技术制备抗腹泻转基因猪奠定基础。

公开(公告)号：CN110819655A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201910953790.8

申请日：2019-10-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李秋艳 ,  林如涛 ,  李志远 ,  郝海阳 ,  史文姝 ,  黄彤彤 ,  牛建芹 ,  李梦然

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/13 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明提供一种乳腺特异性表达抗k88ac抗原抗体基因的同源重组载体及应用。所述同源重组载体是以真核表达载体为骨架载体，同源重组载体中至少包括正筛选元件、负筛选标记基因、抗k88ac抗原抗体基因表达盒以及rosa26基因的同源左臂和同源右臂；其中，正筛选元件包括顺次连接的重组酶识别序列-正筛选标记基因-重组酶基因-重组酶识别序列。利用所述同源重组载体转染哺乳动物体细胞，获得的阳性细胞rosa26基因第一个内含子定点整合抗k88ac抗原抗体基因；利用本发明方法成功获得了乳腺特异性表达抗k88ac抗原抗体的转基因猪细胞系，为通过转基因技术制备抗腹泻转基因猪奠定基础。

公开(公告)号：CN110564696A

公开(公告)日：2019-12-13

申请号：CN201910840600.1

申请日：2019-09-06

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李秋艳 ,  史文姝 ,  赵兴波

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  A61K39/395 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种具有PEDV中和活性的单克隆抗体。本发明所提供的具有PEDV中和活性的单克隆抗体是由“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS-②”分泌产生。所述“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS-②”在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.18312。本发明通过制备具有PEDV中和活性的单克隆抗体，使新生仔猪口服该抗体，可有效减少仔猪的染病几率，并且在同居感染实验中保护率达到100％。结果表明，具有PEDV中和活性的单克隆抗体可有效提高新生仔猪体内的抗体含量，并降低患病风险，且该方法制备简单，操作方便，具有较大应用前景。