公开(公告)号：CN101629217A

公开(公告)日：2010-01-20

申请号：CN200910087563.8

申请日：2009-06-30

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 刘业兵 ,  张磊 ,  宁宜宝 ,  陈蕾

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/78 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的SIV不同亚型的基因序列，针对PA序列相对保守区域设计了SIV RT-LAMP简并引物6条，以猪流感H1、H3、H5、H9亚型毒株为模板，建立了可以检测所有亚型猪流感毒的RT-LAMP方法。利用LA-320 LAMP Tubidimeter仪分析反应过程并判定结果，显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃反应45min，所有实验用的4种亚型SIV样品RNA均获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明：本方法可对100TCID 50 SIV样品RNA进行10 -4 稀释后仍可高效扩增，显示出本方法高度的敏感性；通过特异性实验和19份临床样品的SIV病原的RT-LAMP检测，有5份样品检测到病料中SIV核酸为阳性，与RT-PCR、鸡胚分离结果一致，经基因芯片分型鉴定验证，综合结果符合率为100％。显示本方法特异、敏感、快速，适合用于各种试验条件下SIV的检测。

公开(公告)号：CN101629217B

公开(公告)日：2012-03-28

申请号：CN200910087563.8

申请日：2009-06-30

Applicant: 中国兽医药品监察所

Inventor： 刘业兵 ,  张磊 ,  宁宜宝 ,  陈蕾

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/78 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的SIV不同亚型的基因序列，针对PA序列相对保守区域设计了SIV RT-LAMP简并引物6条，以猪流感H1、H3、H5、H9亚型毒株为模板，建立了可以检测所有亚型猪流感毒的RT-LAMP方法。利用LA-320 LAMP Tubidimeter仪分析反应过程并判定结果，显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃反应45min，所有实验用的4种亚型SIV样品RNA均获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明：本方法可对100TCID50 SIV样品RNA进行10-4稀释后仍可高效扩增，显示出本方法高度的敏感性；通过特异性实验和19份临床样品的SIV病原的RT-LAMP检测，有5份样品检测到病料中SIV核酸为阳性，与RT-PCR、鸡胚分离结果一致，经基因芯片分型鉴定验证，综合结果符合率为100％。显示本方法特异、敏感、快速，适合用于各种试验条件下SIV的检测。