一种通用型全猪源单克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN118773187A

    公开(公告)日:2024-10-15

    申请号:CN202411077473.1

    申请日:2024-08-07

    Abstract: 本发明属于单克隆抗体制备技术领域,具体涉及一种通用型全猪源单克隆抗体的制备方法。本发明基于单个B细胞抗体制备技术,通过流式细胞分选技术从免疫猪或临床康复猪外周血中分离出抗原特异性单个B淋巴细胞;根据数据库中猪源免疫球蛋白IgG抗体基因序列,分别设计引物特异性扩增猪源单个B细胞中抗体重链和轻链完整编码基因并加入His标签,以pCDNA3.1‑Leader为真核表达载体,构建抗体轻重链完整编码基因重组载体,通过哺乳动物细胞表达天然全猪源单克隆抗体。本发明首次建立一种通用型全猪源单克隆抗体制备方法,可用于不同病原的猪源单克隆抗体库的制备及筛选,相较于其他抗体制备方法具有高通量、全猪源、多样性好、抗体完整且天然配对等优势,为快速制备和筛选猪源单克隆抗体提供技术支撑,具有广泛的应用前景。

    猪瘟病毒E2基因重组杆状病毒灭活疫苗制备方法

    公开(公告)号:CN106110319B

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201610517059.7

    申请日:2016-07-04

    Abstract: 本发明涉及猪瘟病毒E2基因重组杆状病毒灭活疫苗及其制备方法。本发明猪瘟病毒E2基因重组杆状病毒灭活疫苗制备方法中:1)带有猪瘟病毒E2基因优化序列的重组杆状病毒能有效表达猪瘟病毒E2蛋白;2)制备的疫苗免疫后可进行鉴别检测:用表达的E2蛋白与选用的佐剂配制成灭活疫苗,因为不是全病毒免疫,可以进行鉴别检测,为今后猪瘟的净化提供物质保障。

    猪瘟病毒E2基因重组杆状病毒灭活疫苗制备方法

    公开(公告)号:CN106110319A

    公开(公告)日:2016-11-16

    申请号:CN201610517059.7

    申请日:2016-07-04

    Abstract: 本发明涉及猪瘟病毒E2基因重组杆状病毒灭活疫苗及其制备方法。本发明猪瘟病毒E2基因重组杆状病毒灭活疫苗制备方法中:1)带有猪瘟病毒E2基因优化序列的重组杆状病毒能有效表达猪瘟病毒E2蛋白;2)制备的疫苗免疫后可进行鉴别检测:用表达的E2蛋白与选用的佐剂配制成灭活疫苗,因为不是全病毒免疫,可以进行鉴别检测,为今后猪瘟的净化提供物质保障。

    牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103343170B

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201310317695.1

    申请日:2013-07-26

    Abstract: 本发明涉及牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒。本发明参考GenBank中BVDV和CSFV序列,设计了一对能够特异性扩增BVDV的引物,扩增目的片段长度为470bp,对RT-PCR反应液及反应条件进行优化,发明了牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测试剂盒。本发明具有以下优点:1)特异性好:特异性扩增BVDV的所有毒株,与其他病原无交叉反应;2)灵敏度高:检测极限可达101.5TCID50/0.1ml;3)操作简单:采用反应预混液,减少操作步骤,缩短反应时间,减少污染风险。本试剂盒可用于猪及牛的BVDV感染检测,也可用于疫苗生产中牛源成分的BVDV污染检测,为动物疫苗质量安全提供有力的保障。

    一种抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN107058239A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710089049.2

    申请日:2017-02-20

    Abstract: 本发明涉及一种抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体细胞株及其应用。本发明筛选得到了一株稳定分泌抗猪瘟病毒E2蛋白的杂交瘤细胞株,该细胞株所分泌的单克隆抗体CSFV‑1C8与CSFV的E2蛋白能够发生特异性反应,而与牛病毒性腹泻/粘膜病病毒E2蛋白不发生反应;该单克隆抗体能特异的识别猪瘟病毒E2蛋白,且其识别的表位为:FDFDGPDGL;本发明的单克隆抗体及该单克隆抗体所识别的猪瘟病毒E2蛋白表位可制成检测CSFV的试剂,为建立猪瘟病毒抗体的血清学检测方法奠定了基础。本发明建立的一种检测猪瘟抗体的竞争ELISA试剂盒具有特异、敏感和操作简便等优点,适合猪瘟抗体的大规模筛查。

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