公开(公告)号：CN107022525A

公开(公告)日：2017-08-08

申请号：CN201710291427.5

申请日：2017-04-28

Applicant: 中卫华医(北京)医院管理有限公司

Inventor： 赵进军 ,  何文丽 ,  邱丽媛 ,  谷广其 ,  李亚平 ,  王晶

IPC: C12N5/0783

CPC classification number: C12N5/0646 ,  C12N2501/998

Abstract: 本发明涉及一种用于肿瘤治疗的NK细胞培养方法，为解决现有技术不能获得大量的、应用安全的、纯度较高的NK细胞问题。其依次包括如下步骤：1）分离单核细胞：2）单核细胞洗涤：3）NK细胞培养；加入培养基，重悬；将用NK细胞因子包被好的包被液吸出，再将细胞悬液转移到包被过的培养瓶中，再加入自体灭活血清、培养；Day 1‑12 NK细胞前期扩增，每次扩增需加自体血清；NK细胞后期扩增：在NK细胞后期扩大培养时使用OKM200培养基，使用方法与OKM100一样，最后扩增到1×109以上即可；最后一次扩繁用培养袋培养；Day12无菌检测后Day14 收获。具有可在体外培养条件下获得大量的、应用安全的、纯度较高的以及杀伤活性强的NK细胞，从而使得该细胞达到能够安全有效的应用于临床的质量指标的优点。

公开(公告)号：CN107090433A

公开(公告)日：2017-08-25

申请号：CN201710290044.6

申请日：2017-04-28

Applicant: 中卫华医(北京)医院管理有限公司

Inventor： 赵进军 ,  何文丽 ,  邱丽媛 ,  谷广其 ,  李亚平 ,  王晶

IPC: C12N5/0783

CPC classification number: C12N5/0638 ,  C12N2501/998

Abstract: 本发明涉及一种用于肿瘤治疗的T细胞培养方法，为解决现有技术不能大量体外获得T细胞的问题，其包括下列步骤：1）分离单核细胞：2）单核细胞洗涤：3）单核细胞培养：根据前步骤中测得的细胞总数，加入含BK‑AEC‑IL2的淋巴细胞无血清培养基，重悬；将CD3单抗包被好的透气盖细胞培养瓶中的保护液吸出，再将细胞悬液转移到包被过的细胞培养瓶中，旋紧瓶盖，置于培养箱中37℃，5% CO2培养；4）Day 1‑14扩增：T细胞后期扩增：在T细胞后期扩大培养时用细胞培养袋培养，最后扩增到1‑3×109以上即可；Day12无菌检测：5）Day14 收获。具有可在体外培养条件下获得大量的、应用安全的、纯度很高的细胞毒性T细胞，从而使得该细胞达到能够安全有效的应用于临床的质量指标的优点。