一种油茶胚性愈伤组织原生质体分离与体细胞杂交的方法

    公开(公告)号:CN118667746A

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202410866857.5

    申请日:2024-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种油茶胚性愈伤组织原生质体分离与体细胞杂交的方法,属于植物生物技术领域。本发明方法包括以下步骤:将油茶胚性愈伤组织进行0~48h黑暗预处理,真空气压负0.09~0MPa下抽真空0~15min,加入含纤维素酶R‑10、离析酶R‑10的酶液进行酶解;酶解后的溶液过滤后离心去上清,用W缓冲液对原生质体进行清洗和重悬,静置去上清,得到油茶胚性愈伤组织原生质体;将油茶胚性愈伤组织原生质体和油茶叶肉原生质体调整为两种原生质体数量相同的混合液,加入等体积的融合剂,诱导原生质体融合。通过本发明获得的原生质体产量达3.16×106个/g·FW、活力高达93%以上,原生质体融合率达13.81%。

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