公开(公告)号：CN115236328B

公开(公告)日：2023-02-03

申请号：CN202211154356.1

申请日：2022-09-22

Applicant: 中南大学湘雅医院

Inventor： 彭健 ,  沈绎伦 ,  汤旸玚 ,  彭宁 ,  向源楚 ,  李虎

IPC: G01N33/561 ,  G01N33/574 ,  G01N33/68 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明公开一种基于二维电泳的人源细胞蛋白质脱酰胺化的检测方法及其应用，方法包括：S1、细胞培养与处理：将原代培养的人源细胞，加入6‑重氮‑5‑氧代‑L‑正亮氨酸处理或将慢病毒感染导入shRNA处理后得到的样品作为实验组，与对应的空白对照组，培养后收集细胞样品；S2、将细胞样品制成二维电泳样品；S3、二维电泳；S4、SDS‑PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳；S5、结果分析：根据实验组与对应空白对照组的细胞样品的同种蛋白迁移趋势分析，判断人源细胞蛋白质的脱酰胺化修饰程度。本方法具有操作简便和特异性强的优点，可缩短鉴定蛋白质脱酰胺化反应的实验周期，节约实验成本，能应用于人源肿瘤细胞相关蛋白质组学分析。

公开(公告)号：CN115236328A

公开(公告)日：2022-10-25

申请号：CN202211154356.1

申请日：2022-09-22

Applicant: 中南大学湘雅医院

Inventor： 彭健 ,  沈绎伦 ,  汤旸玚 ,  彭宁 ,  向源楚 ,  李虎

IPC: G01N33/561 ,  G01N33/574 ,  G01N33/68 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明公开一种基于二维电泳的人源细胞蛋白质脱酰胺化的检测方法及其应用，方法包括：S1、细胞培养与处理：将原代培养的人源细胞，加入6‑重氮‑5‑氧代‑L‑正亮氨酸处理或将慢病毒感染导入shRNA处理后得到的样品作为实验组，与对应的空白对照组，培养后收集细胞样品；S2、将细胞样品制成二维电泳样品；S3、二维电泳；S4、SDS‑PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳；S5、结果分析：根据实验组与对应空白对照组的细胞样品的同种蛋白迁移趋势分析，判断人源细胞蛋白质的脱酰胺化修饰程度。本方法具有操作简便和特异性强的优点，可缩短鉴定蛋白质脱酰胺化反应的实验周期，节约实验成本，能应用于人源肿瘤细胞相关蛋白质组学分析。