公开(公告)号：CN111154758A

公开(公告)日：2020-05-15

申请号：CN202010053090.6

申请日：2020-01-17

Applicant: 中南大学湘雅二医院

Inventor： 谢鼎华 ,  赖若沙 ,  谢华平 ,  付贵芳 ,  杨曙 ,  曾婷 ,  谢缤灵 ,  邓慧玲 ,  胡昱瑶

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N15/89 ,  A01K67/027 ,  A01K67/02

Abstract: 本发明涉及基因敲除技术领域，尤其涉及敲除斑马鱼slc26a4基因的方法。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，在斑马鱼slc26a4基因上设计合适的打靶位点，在体外合成特异性sgRNA和Cas9-mRNA用于斑马鱼的基因编辑。本发明能更高效且更精确地沉默特定基因，且制作简单、成本低，且可同时对靶基因上多个位点进行剪切，沉默任意数目的单个基因，本发明还提供了基因敲除选育slc26a4基因缺失型斑马鱼的方法，该方法构得的斑马鱼模型，有助于进一步揭示人类大前庭水管症发生的整个过程以及调控这个过程的分子机制，在医学上对前庭水管症病理的理解和新的治疗方案的研发中具有十分重要的意义。

公开(公告)号：CN113308568A

公开(公告)日：2021-08-27

申请号：CN202110476368.5

申请日：2021-04-29

Applicant: 湖南师范大学 ,  中南大学湘雅二医院

Inventor： 谢华平 ,  谢鼎华 ,  付贵芳 ,  王飞英 ,  曾婷 ,  谢缤灵

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种检测2019‑nCOV的RNA探针，该探针的序列如SEQ ID NO.1或SEQID NO.21所示；制备过程包括：设计引物、构建重组质粒、PCR扩增、产物纯化、体外转录的过程；将制备得到的探针应用于检测2019‑nCOV中，能够在单细胞水平检测2019‑nCOV病毒核酸，提高了检测的灵敏度。

公开(公告)号：CN113308568B

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202110476368.5

申请日：2021-04-29

Applicant: 湖南师范大学 ,  中南大学湘雅二医院

Inventor： 谢华平 ,  谢鼎华 ,  付贵芳 ,  王飞英 ,  曾婷 ,  谢缤灵

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种检测2019‑nCOV的RNA探针，该探针的序列如SEQ ID NO.1或SEQID NO.21所示；制备过程包括：设计引物、构建重组质粒、PCR扩增、产物纯化、体外转录的过程；将制备得到的探针应用于检测2019‑nCOV中，能够在单细胞水平检测2019‑nCOV病毒核酸，提高了检测的灵敏度。

公开(公告)号：CN111647684A

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN202010358187.8

申请日：2020-04-29

Applicant: 湖南师范大学 ,  中南大学湘雅二医院

Inventor： 谢华平 ,  谢鼎华 ,  付贵芳 ,  王飞英 ,  曾婷 ,  谢缤灵

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6841 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种检测2019-nCOV的RNA探针，该探针的序列如SEQ ID NO.1所示；制备过程包括：设计引物、合成新的引物、构建重组质粒、PCR扩增、产物纯化、体外转录的过程；将制备得到的探针应用于检测2019-nCOV中，能够在单细胞水平检测2019-nCOV病毒核酸，提高了检测的灵敏度。

公开(公告)号：CN111154759A

公开(公告)日：2020-05-15

申请号：CN202010053116.7

申请日：2020-01-17

Applicant: 中南大学湘雅二医院

Inventor： 谢鼎华 ,  赖若沙 ,  杨曙 ,  谢华平 ,  曾婷 ,  谢缤灵 ,  付贵芳 ,  邓慧玲 ,  胡昱瑶

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及基因敲除技术领域，尤其涉及敲除斑马鱼myo7ab基因的方法。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，在斑马鱼myo7ab基因上设计合适的打靶位点，在体外合成特异性sgRNA和Cas9-mRNA用于斑马鱼的基因编辑。本发明能更高效且更精确地沉默特定基因，且制作简单、成本低，且可同时对靶基因上多个位点进行剪切，沉默任意数目的单个基因，本发明还提供了基因敲除选育myo7ab基因缺失型斑马鱼的方法，该方法构得的斑马鱼模型，有助于进一步揭示耳泡及毛细胞形态发生的整个过程以及调控这些过程的分子机制，在医学上先天性耳聋致病机理的理解和基因矫正的治疗方案的研发中具有十分重要的意义。

公开(公告)号：CN111118009A

公开(公告)日：2020-05-08

申请号：CN202010054360.5

申请日：2020-01-17

Applicant: 中南大学湘雅二医院

Inventor： 谢鼎华 ,  赖若沙 ,  谢华平 ,  董运鹏 ,  谢缤灵 ,  付贵芳 ,  曾婷 ,  杜涵

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明涉及基因敲除技术领域，尤其涉及敲除斑马鱼p2rx2基因的方法。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，在斑马鱼p2rx2基因上设计合适的打靶位点，在体外合成特异性sgRNA和Cas9-mRNA用于斑马鱼的基因编辑。本发明能更高效且更精确地沉默特定基因，且制作简单、成本低，且可同时对靶基因上多个位点进行剪切，沉默任意数目的单个基因，本发明还提供了基因敲除选育p2rx2基因缺失型斑马鱼的方法，该方法构得的斑马鱼模型，有助于进一步揭示耳泡以及毛细胞形态发生的整个过程以及调控这些过程的分子机制，在医学上先天性耳聋致病机理的理解和基因矫正的治疗方案的研发中具有十分重要的意义。