一种来源于人体肠道微生物的稀土金属依赖性乙醇脱氢酶的用途

    公开(公告)号:CN118620858A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410902569.0

    申请日:2024-07-07

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种来源于人体肠道微生物的稀土金属依赖性乙醇脱氢酶的用途,利用PCR扩增技术合成稀土金属依赖性蛋白的基因exaF,发现该基因编码的蛋白ExaF_M.r.具有优良的酶学特性,具有与稀土金属结合的优良特性,在REMs(轻稀土金属)存在时,酶活性能显著提高;与其他稀土依赖性蛋白不同的突出特点是,ExaF_M.r.在HREMs(重稀土金属)存在的情况下仍能保持较高的活性,表明该蛋白不仅能结合轻稀土金属,还能结合重稀土金属。本发明获得的稀土金属依赖性蛋白的基因exaF可克隆到合适的宿主中实现表达,实现工业化生产稀土金属依赖性蛋白,为后续的稀土金属的生物分离技术提供可供改造的生物大分子,提供成本低廉的稀土金属依赖性蛋白原始材料。同时,ExaF_M.r.的特殊稀土金属选择性扩宽了人们对REMs生物采矿、生物浸出和回收过程应用前景的认识,为开发环境友好型生物技术高效分离稀土金属提供理论基础,具有重要的经济和社会价值。

    一种体外培养筛选代谢乙醇菌株的方法

    公开(公告)号:CN117210330A

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311195283.5

    申请日:2023-09-16

    Applicant: 中南大学

    Inventor: 余正 王菁妍 黄静

    Abstract: 本发明公开了一种基于体外培养筛选代谢乙醇菌株的方法,对收集到人体粪便样本进行乙醇为单一碳源的胁迫传代培养,结合多种高通量测序手段以及化学分析手段获得具有乙醇代谢能力的菌株。通过持续不断的对粪便样品进行培养驯化,进而筛选得到能代谢特定底物的优势细菌,通过扩增子测序手段进一步得到该优势物种的组成信息。接着在培养前后,宏基因组的结果表明样品整体与乙醇代谢相关的基因也发生巨变。经过培养后,与乙醇代谢相关的基因存在不同程度的富集。对培养之后的样本进一步的分离纯化培养,分离得到了6株优势细菌。本发明具有较强的实操性和专一性,能广泛应用在分离研究具有特定底物代谢能力的细菌。

    来源于深海细菌的α-葡萄糖苷酶QsGH13的三维结构及其晶体制备和应用

    公开(公告)号:CN114774390A

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202210075876.7

    申请日:2022-01-23

    Applicant: 中南大学

    Inventor: 黄静 余正 翟星宇

    Abstract: 本发明公开了来源于深海细菌的α‑葡萄糖苷酶QsGH13的三维结构及其晶体制备和应用。申请人通过结晶条件的筛选,获得了α‑葡萄糖苷酶QsGH13的晶体并通过X射线衍射的方法获得了其结构坐标,解析得到了其三维结构。一个晶体学不对称单位中有两个蛋白分子,该结构由20个β链和19个α螺旋组成,其中这些β链又形成5个β折叠片层。该晶体三维结构的解析将在食品、卫生等产业对人工筛选及改造酶的底物与酶活方面具有一定的应用前景,可在酒精发酵、糖类水解、化学合成等领域中推广应用。

    来源于深海细菌的α-葡萄糖苷酶QsGH13的三维结构及其晶体制备和应用

    公开(公告)号:CN114774390B

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202210075876.7

    申请日:2022-01-23

    Applicant: 中南大学

    Inventor: 黄静 余正 翟星宇

    Abstract: 本发明公开了来源于深海细菌的α‑葡萄糖苷酶QsGH13的三维结构及其晶体制备和应用。申请人通过结晶条件的筛选,获得了α‑葡萄糖苷酶QsGH13的晶体并通过X射线衍射的方法获得了其结构坐标,解析得到了其三维结构。一个晶体学不对称单位中有两个蛋白分子,该结构由20个β链和19个α螺旋组成,其中这些β链又形成5个β折叠片层。该晶体三维结构的解析将在食品、卫生等产业对人工筛选及改造酶的底物与酶活方面具有一定的应用前景,可在酒精发酵、糖类水解、化学合成等领域中推广应用。

    一种深海细菌来源的α-葡萄糖苷酶QsGH97a及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN113969290B

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202111356942.X

    申请日:2021-11-16

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种深海细菌来源的α‑葡萄糖苷酶QsGH97a及其编码基因与应用,从国家海洋局第二海洋研究所提供的细菌基因组文库中筛选获得α‑葡萄糖苷酶QsGH97a基因,通过表达纯化α‑葡萄糖苷酶QsGH97a发现其具有较好的酶学性质,可用于工业上葡萄糖的生产,可应用于糖类水解相关的食品加工和化学工业中。获得的α‑葡萄糖苷酶基因可克隆到合适的宿主中实现异源表达,且纯化方法简单,可实现工业化生产α‑葡萄糖苷酶,应用于大量生产葡萄糖的化学工业中,此外,其优良的耐碱性和耐盐性使其在特殊的工业生产中具有前景。

    一种SjHNF4多肽抗体、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN116284333A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310263968.2

    申请日:2023-03-18

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种SjHNF4多肽抗体、制备方法及应用。制备方法包括以下步骤:下载SjHNF4蛋白序列,筛选多肽序列,在N端增添一个半胱氨酸,随后进行多肽合成和纯化,偶联得到重组多肽,并将偶联的多肽与弗氏完全佐剂混合得到混合物;利用混合物免疫哺乳动物,采取该哺乳动物的心脏血液并分离血清,获得多肽抗体。利用ELISA方法检测多肽抗体效价,然后用多肽亲和层析柱纯化多肽抗体。最后通过WesternBlot和免疫荧光实验检测抗体与抗原的结合亲和力。本发明所得多肽抗体具有高纯度(不低于90%)和高效价(不低于512000),纯度和免疫原性都较好,可满足多种实验需求并具有商业化价值。

    一种深海细菌来源的α-葡萄糖苷酶QsGH97a及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN113969290A

    公开(公告)日:2022-01-25

    申请号:CN202111356942.X

    申请日:2021-11-16

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种深海细菌来源的α‑葡萄糖苷酶QsGH97a及其编码基因与应用,从国家海洋局第二海洋研究所提供的细菌基因组文库中筛选获得α‑葡萄糖苷酶QsGH97a基因,通过表达纯化α‑葡萄糖苷酶QsGH97a发现其具有较好的酶学性质,可用于工业上葡萄糖的生产,可应用于糖类水解相关的食品加工和化学工业中。获得的α‑葡萄糖苷酶基因可克隆到合适的宿主中实现异源表达,且纯化方法简单,可实现工业化生产α‑葡萄糖苷酶,应用于大量生产葡萄糖的化学工业中,此外,其优良的耐碱性和耐盐性使其在特殊的工业生产中具有前景。

    一种甲基营养菌来源的乙醇脱氢酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN115976063B

    公开(公告)日:2024-11-29

    申请号:CN202310044217.1

    申请日:2023-01-29

    Applicant: 中南大学

    Inventor: 余正 肖颖 黄静

    Abstract: 本发明公开了一种来源于甲基营养菌Methylopilasp.M107的乙醇脱氢酶及其编码基因与应用,利用TwistBiosciences方法合成乙醇脱氢酶基因,发现了该基因编码蛋白具有优良的酶学特性,具有广泛的底物特异性且对于乙醇的活性最高。本发明获得的乙醇脱氢酶基因可克隆到合适的宿主中实现表达,实现工业化生产乙醇脱氢酶,为后续的工业应用提供成本低廉的乙醇脱氢酶原始材料。该酶在疾病诊断、临床治疗、生命体的代谢机理研究、酒精浓度的计算、生物传感器的制备以及化学合成等化工领域应用广泛,具有重要的经济和社会价值。

    一种甲基营养菌来源的乙醇脱氢酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN115976063A

    公开(公告)日:2023-04-18

    申请号:CN202310044217.1

    申请日:2023-01-29

    Applicant: 中南大学

    Inventor: 余正 肖颖 黄静

    Abstract: 本发明公开了一种来源于甲基营养菌Methylopilasp.M107的乙醇脱氢酶及其编码基因与应用,利用TwistBiosciences方法合成乙醇脱氢酶基因,发现了该基因编码蛋白具有优良的酶学特性,具有广泛的底物特异性且对于乙醇的活性最高。本发明获得的乙醇脱氢酶基因可克隆到合适的宿主中实现表达,实现工业化生产乙醇脱氢酶,为后续的工业应用提供成本低廉的乙醇脱氢酶原始材料。该酶在疾病诊断、临床治疗、生命体的代谢机理研究、酒精浓度的计算、生物传感器的制备以及化学合成等化工领域应用广泛,具有重要的经济和社会价值。

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