公开(公告)号：CN111480621B

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202010525262.5

申请日：2020-06-10

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  任立品 ,  陈威

IPC: A01K67/033 ,  A01M1/02 ,  A01M1/10

Abstract: 本发明提供了一种嗜尸性甲虫的收集和实验室饲养方法，包括以下步骤：步骤1，野外收集嗜尸性甲虫成虫或幼虫；步骤2，制作嗜尸性甲虫实验室培养基质和饲料；步骤3，嗜尸性甲虫的实验室饲养；步骤4，孵化，蜕皮，化蛹，羽化和传代；步骤5，嗜尸性甲虫各生命阶段发育资料的收集；步骤6，嗜尸性甲虫各幼虫阶段体长的测量。本发明操作简便，实用性强，原料广泛易得，成本低廉，便于推广和使用，而且包含从甲虫诱捕、饲养、传代、数据收集等一系列操作，可以满足各大高校或者科研所实验室对嗜尸性甲虫研究的需要，也为涉及嗜尸性甲虫死亡时间推断的刑事案件调查提供了实践需要。

公开(公告)号：CN114868708A

公开(公告)日：2022-08-09

申请号：CN202210396336.9

申请日：2022-04-15

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  杨凤芹 ,  冯亚凯

IPC: A01K67/033 ,  A23K50/90 ,  A23K10/30 ,  A23K10/26 ,  A23K10/37 ,  A23K10/16

Abstract: 本发明提供了一种棕尾别麻蝇的养殖驯化方法，包括如下步骤：诱捕野生棕尾别麻蝇并进行物种鉴定、棕尾别麻蝇成虫养殖、棕尾别麻蝇幼虫养殖与利用、棕尾别麻蝇化蛹与消毒灭菌、棕尾别麻蝇羽化与传代、棕尾别麻蝇人工驯化。经过几十代重复养殖驯化后的棕尾别麻蝇，已经完全适应在人工饲养环境下生长，且驯化后的棕尾别麻蝇与野生型的棕尾别麻蝇对比，其蛹及成虫的体积和大小都要远远大于野生型，产幼率，化蛹率，羽化率都大于野生型，死亡率远远小于野生型。本发明不仅能够获得大量发育良好、适应人工养殖的棕尾别麻蝇，且操作简便，实用性强，原料广泛易得，成本低廉，便于推广和使用，为开展棕尾别麻蝇的实际转化应用和研究提供了更好的优质蝇种。

公开(公告)号：CN114752682A

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202210394448.0

申请日：2022-04-14

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  任立品

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种嗜尸性蝇类蛹期日龄推断试剂盒及应用，首次筛选出一种可以用于推算棕尾别麻蝇蛹期发育时间的差异表达基因，分子标记evm.model.Contig 1.824目的基因，然后根据其DNA序列设计特异性扩增引物组合，以actin为内参基因，以不同发育日龄的棕尾别麻蝇蛹为样本，提取RNA，然后反转录cDNA为模板，进行目的基因的qRT‑PCR扩增和相对定量分析，获得该目的基因在棕尾别麻蝇不同发育日龄蛹样本中的相对表达量变化，同时获得棕尾别麻蝇该目的基因相对表达量和蛹期发育日龄的拟合回归方程，通过检测现场棕尾别麻蝇蛹期样本中evm.model.Contig 1.824目的基因的相对表达量，计算棕尾别麻蝇蛹期的发育日龄，进而用于PMI推断。本发明操作简便，实用性强，便于推广和使用。

公开(公告)号：CN111480621A

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN202010525262.5

申请日：2020-06-10

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  任立品 ,  陈威

IPC: A01K67/033 ,  A01M1/02 ,  A01M1/10

Abstract: 本发明提供了一种嗜尸性甲虫的收集和实验室饲养方法，包括以下步骤：步骤1，野外收集嗜尸性甲虫成虫或幼虫；步骤2，制作嗜尸性甲虫实验室培养基质和饲料；步骤3，嗜尸性甲虫的实验室饲养；步骤4，孵化，蜕皮，化蛹，羽化和传代；步骤5，嗜尸性甲虫各生命阶段发育资料的收集；步骤6，嗜尸性甲虫各幼虫阶段体长的测量。本发明操作简便，实用性强，原料广泛易得，成本低廉，便于推广和使用，而且包含从甲虫诱捕、饲养、传代、数据收集等一系列操作，可以满足各大高校或者科研所实验室对嗜尸性甲虫研究的需要，也为涉及嗜尸性甲虫死亡时间推断的刑事案件调查提供了实践需要。

公开(公告)号：CN118858466A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410859632.7

申请日：2024-06-28

Applicant: 中南大学

Inventor： 尚艳杰 ,  陈玉娇 ,  张诗敏 ,  夏扬

IPC: G01N30/02 ,  G06N5/04 ,  G06F17/11 ,  G06F17/18 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86 ,  G01N1/42 ,  G01N1/40

Abstract: 利用两种独特碳氢化合物进行嗜尸性蝇类蛹壳风化时间推断的方法，包括以下步骤；步骤1：蛹壳样本收集；收集成虫进行传代饲养，再收集羽化后的蛹壳样本；步骤2：样本预处理：将蛹壳样本液氮冷冻，低温储存；步骤3：表皮碳氢化合物的提取:将冷冻的蛹壳用有机溶液进行萃取；步骤4：GS‑MS上机分析：取萃取液，进行GS‑MS分析；步骤5：数据分析及模型构建：对GS‑MS下机数据进行分析，构建两种独特碳氢化合物(C17、6‑Methyl C19)在三种嗜尸性蝇类蛹壳不同风化时间的拟合方程。本发明能够对蛹壳风化时间进行较为准确的推断，为应用嗜尸性蝇类解决实际案件中的PMI推断问题提供更为充分的参考依据，提高PMI推断的准确性，建立更加科学完善的方法体系。

公开(公告)号：CN114839025B

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202210396330.1

申请日：2022-04-15

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  杨凤芹 ,  冯亚凯

IPC: G01N1/30 ,  G01N1/36 ,  G01N1/06

Abstract: 本发明提供了一种嗜尸性蝇类蛹组织石蜡切片染色方法，其依次包括以下步骤：组织预处理、组织固定、组织脱水、组织透明、浸蜡、包埋与切片、展片与烘片、脱蜡和组织复水、染色、脱水与透明、封片和观察。本申请最终切片对蛹组织内部各个器官的区分度高，能观察到嗜尸性蝇类蛹组织完整的空间结构，适用于有坚硬外壳、液体含量较高、固定液渗透较慢的嗜尸性蝇类蛹组织虫体；本染色方法处理嗜尸性蝇类蛹组织，在显微镜下可以清晰地观察到大脑、胸神经节、胸部肌肉、黄体、直肠袋、触角、咽扩张肌、性腺等蛹组织内部结构器官，且该方法具有操作简单、耗时短、成本低等优势；本申请还填补了嗜尸性蝇类蛹组织内部器官及组织观察的空白。

公开(公告)号：CN114752682B

公开(公告)日：2023-09-08

申请号：CN202210394448.0

申请日：2022-04-14

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  任立品

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种嗜尸性蝇类蛹期日龄推断试剂盒及应用，首次筛选出一种可以用于推算棕尾别麻蝇蛹期发育时间的差异表达基因，分子标记evm.model.Contig 1.824目的基因，然后根据其DNA序列设计特异性扩增引物组合，以actin为内参基因，以不同发育日龄的棕尾别麻蝇蛹为样本，提取RNA，然后反转录cDNA为模板，进行目的基因的qRT‑PCR扩增和相对定量分析，获得该目的基因在棕尾别麻蝇不同发育日龄蛹样本中的相对表达量变化，同时获得棕尾别麻蝇该目的基因相对表达量和蛹期发育日龄的拟合回归方程，通过检测现场棕尾别麻蝇蛹期样本中evm.model.Contig 1.824目的基因的相对表达量，计算棕尾别麻蝇蛹期的发育日龄，进而用于PMI推断。本发明操作简便，实用性强，便于推广和使用。

公开(公告)号：CN114468190A

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN202210211548.5

申请日：2022-03-04

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  任立品 ,  尚艳杰 ,  杨凤芹 ,  张祥彦

IPC: A23K50/90 ,  A23K10/30 ,  A23K10/20 ,  A23K20/163 ,  A23K10/26 ,  A01K67/033

Abstract: 本发明提供了一种红尾粪麻蝇成虫和幼虫的人工饲料及制备方法，人工饲养方法；红尾粪麻蝇成虫人工饲料按重量百分比计，包括大豆粉25‑50、奶粉25‑50、细砂糖10‑15；红尾粪麻蝇幼虫人工饲料按重量百分比计，包括新鲜猪肺20‑40、猪粪10‑30、牛粪10‑30、奶粉5‑10、琼脂粉3‑5和若干纯净水；制备方法包括打碎、搅拌、烘烤和混水。饲养方法包括饲养准备、成虫饲养、诱导产幼、幼虫饲养、化蛹观察和羽化成虫。本发明的红尾粪麻蝇成虫和幼虫的人工饲料及人工饲养方法实现了红尾粪麻蝇的人工饲养，解决了红尾粪麻蝇饲养过程中的发育不同步等技术性难题，为开展红尾粪麻蝇的嗜尸性行为研究提供了更好的材料。

公开(公告)号：CN111100934B

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN202010031937.0

申请日：2020-01-13

Applicant: 中南大学

Inventor： 郭亚东 ,  尚艳杰 ,  张祥彦 ,  蔡继峰

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于推算棕尾别麻蝇幼虫期发育时间的分子标记、引物组合物及检测试剂盒和应用，分子标记为Sp Lamp11.268目的基因，引物组合物包括Lamp‑F和Lamp‑R。用于推算棕尾别麻蝇幼虫期发育时间的试剂盒，包括引物组合物和缓冲液。Sp Lamp11.268目的基因参与膜糖蛋白的合成，同时在不同发育时期差异表达显著；结合qRT‑PCR技术筛选出幼虫期发育时间推算的分子遗传标记，构建差异表达基因与发育时间的回归方程以进行不同发育阶段辅助判定，可用于推算棕尾别麻蝇幼虫期发育时间，为实际案件中PMI推断应用提供更加科学、客观、公正的数据参考。

公开(公告)号：CN118910068A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202410800244.1

申请日：2024-06-20

Applicant: 中南大学

Inventor： 尚艳杰 ,  夏扬 ,  陈玉娇 ,  张诗敏

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明首次提出了一种基于LCP22基因的dsRNA在棕尾别麻蝇防治中的应用，属于基因工程技术和害虫防治领域。首次利用RNA干扰(RNAi)技术靶向棕尾别麻蝇的LCP22基因(SP_LCP22)，通过体外合成的双链RNA(dsRNA)针对SP_LCP22基因进行干扰，观察到与对照组相比，dsRNA干扰后的棕尾别麻蝇在变态发育过程中出现蛹和成虫发育畸形，化蛹率和羽化率显著降低等表型，此外，RNAi干扰还导致其他生长发育相关基因表达显著下降，以上表示基于LCP22基因的dsRNA可以有效杀死棕尾别麻蝇，并显著降低棕尾别麻蝇的存活率，在棕尾别麻蝇防治中具有重要意义。