大鼠大网膜脂肪来源间充质干细胞的提取方法和专用培养基

    公开(公告)号:CN103184191A

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201210512416.2

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种分离提取大鼠大网膜脂肪间充质干细胞的方法和专用培养基。无菌条件下取健康斯泼累格·多雷(Sprague Dawley,SD)大鼠的大网膜脂肪,剪碎后用冰磷酸盐缓冲液混合后离心,去除部分脂肪组织。用I型和II混合胶原酶消化离心,去除上部脂肪细胞组织。再次离心后用加入含有特定化学物质和生长因子的专用培养基重悬后移入培养瓶中放入培养箱中持续传代培养。本发明在大鼠体内提出一种大网膜脂肪来源的间充质干细胞,同时在培养过程中通过添加特定的化学物质和生长因子的专用培养既可以解决干细胞在体外培养中容易衰老以及分化问题,获得了一种能长期保持干细胞特性的大网膜脂肪来源的间充质干细胞。

    人脐带间充质干细胞的提取和培养方法

    公开(公告)号:CN102965338A

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201210510379.1

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞的提取和培养方法。脐带组织切碎后经I型胶原酶消化后移入含培养基的培养瓶中持续培养。所用培养基为低糖DMEM基础培养基并且添加了胎牛血清、成纤维生长因子、上皮细胞生长因子、细胞转录因子、胆固醇。使用本发明的提取和培养方法可以长期培养人的脐带间充质干细胞,并且维持干细胞活性。本发明解决了目前人脐带间充质干细胞培养中细胞衰老过快以及分化问题,能够长期获得具有干细胞特性的人脐带间充质干细胞。

    分离提取人皮下脂肪间充质干细胞的方法和提取专用培养基

    公开(公告)号:CN102965337A

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201210510328.9

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种分离提取人皮下脂肪间充质干细胞的方法和提取专用培养基。人的皮下脂肪组织切碎后4℃下离心去除大块脂肪组织,加入混合的I型和II型胶原酶水浴消化。用提取专用培养基重悬后,37℃水浴。过滤收集细胞后加入提取专用培养基进行原代细胞培养5-7天。原代培养后的细胞可以使用普通培养基培养,且可以进行连续培养。提取专用培养基包含低糖达尔伯克氏改良伊格尔培养基培养基,添加一定浓度的胎牛血清、重组成纤维生长因子、表皮生长因子、胰岛素、乙酰半胱氨酸、甲状腺原氨酸。本发明可以从人皮下脂肪中提取大量脂肪来源间充质干细胞,原代培养的细胞内干细胞纯度较高,且干细胞活性较强。

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