一种合成的噬菌体展示纳米抗体文库及其应用

    公开(公告)号:CN104233474A

    公开(公告)日:2014-12-24

    申请号:CN201410476943.1

    申请日:2014-09-17

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米抗体保守框架cAbBCII10的CDR3区氨基酸序列随机化但不含半胱氨酸及终止密码子的噬菌体展示纳米抗体文库,并利用该文库筛选获得具有特异性和检测功能的前白蛋白纳米抗体,公布了该前白蛋白纳米抗体VHH链的氨基酸序列以及编码该纳米抗体的基因序列,此外,还提供了一种能够表达该纳米抗体的宿主细胞,并介绍了前白蛋白纳米抗体在检测前白蛋白方面的用途。

    一种天然的双峰驼源噬菌体展示纳米抗体文库、构建方法及用途

    公开(公告)号:CN104404630A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410762748.5

    申请日:2014-12-11

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开一种天然的双峰驼源噬菌体展示纳米抗体文库,由以下制备步骤得到:采取未经免疫任何抗原的双峰驼的血样和脾脏,提取总的mRNA,反转录成cDNA,利用套式PCR扩增VHH;使用限制性的内切酶Pst I及Not I酶切pMECS噬菌体展示载体及VHH并连接两个片段;将连接产物电转化至感受态细胞TG1中。本发明还公开其构建方法及在筛选针对PCT和NAGL的纳米抗体方面的应用。本发明构建的天然噬菌体展示文库能够筛选获得具有特异性和检测功能的纳米抗体,可以解决由于抗原因素造成无法免疫骆驼导致无法构建相应噬菌体展示文库而无法得到纳米抗体的问题,同时这样的文库也能解决免疫骆驼耗时较长的问题。

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