公开(公告)号：CN1609229A

公开(公告)日：2005-04-27

申请号：CN200410013635.1

申请日：2004-03-22

Applicant: 东北林业大学 ,  安志刚 ,  祖元刚

Inventor： 安志刚 ,  祖元刚 ,  付玉杰

IPC: C12P21/02 ,  C12N15/70

Abstract: 一种植物金属硫蛋白双聚体的制备方法其特征包括：利用基因工程技术构建植物金属硫蛋白双聚体基因序列，选择开发性质粒pQe系列，并在特选大肠杆菌(Rosetta gami)中来表达植物金属硫蛋白双聚体。将植物金属硫蛋白双聚体工程菌在LB培养液中进行培养。然后离心收集菌体，用缓冲液悬浮菌体，破碎菌体，再离心，上清液与镍琼脂糖在4℃中进行亲和吸附一小时，然后上柱洗脱、收集馏分、脱盐后即可得到植物金属硫蛋白双聚体。本发明提供一种制备低成本、高产量、高纯度的植物金属硫蛋白双聚体的方法。

公开(公告)号：CN1654655A

公开(公告)日：2005-08-17

申请号：CN200510009610.9

申请日：2005-01-10

Applicant: 东北林业大学 ,  祖元刚

Inventor： 祖元刚 ,  于景华 ,  唐中华 ,  安志刚 ,  刘士刚 ,  王丽娟

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/63 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明提供了一种新的抗旱基因喜树caGRP基因的cDNA全长片段，此cDNA全长片段包括编码具有富甘氨酸RNA结合蛋白(glycin－rich RNA－binding protein，GRP)的功能区序列，所述的核苷酸序列编码的蛋白质序列与基因库中与基因库中另一典型抗旱植物长春花GRP(crGRP)的同源性为71.34％。本发明还提供了该cDNA片段及其质粒的制备方法。该cDNA片段可用于近缘种，特别是喜树在干旱地区培育时的转基因育种需要。

公开(公告)号：CN1644699A

公开(公告)日：2005-07-27

申请号：CN200410044118.0

申请日：2004-12-13

Applicant: 东北林业大学 ,  安志刚 ,  祖元刚

Inventor： 安志刚 ,  祖元刚

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/09 ,  C07K14/415

Abstract: 一种植物金属硫蛋白的制备方法其特征包括：利用基因工程技术构建植物金属硫蛋白与硫氧还蛋白融合基因序列，选择开发性质粒pEMT20，并在特选大肠杆菌中来表达植物金属硫蛋白与硫氧还蛋白融合体。将植物金属硫蛋白与硫氧还蛋白融合体工程菌在LB培养液中进行培养。然后离心收集菌体，用缓冲液悬浮菌体，破碎菌体，再离心，上清液与镍琼脂糖在4℃中进行亲和吸附一小时，上柱洗脱、收集馏分、脱盐、酶切后即可得到植物金属硫蛋白。本发明提供一种制备低成本、高产量、高纯度的植物金属硫蛋白的方法。