一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法

    公开(公告)号:CN102893858B

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:CN201110214552.9

    申请日:2011-07-29

    Abstract: 一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法,其特征是:1)从无菌实生苗根段获得的胚性愈伤组织分别在分化培养条件和增殖培养条件下进行摇瓶悬浮培养;2)根据体细胞胚不同发育状况定期取材,并计算它们的生物生长量;3)分析体细胞胚各发育时期材料中楤木总皂苷、齐墩果酸、总黄酮的累积;4)体细胞胚苗中各成分含量最高,总皂苷占栽培植株根中含量的29.7%;齐墩果酸占栽培植株根中含量的29.9%;总黄酮占栽培植株叶中含量的42.8%,且体细胞胚苗中三种物质累积效率最高,分别为:总皂苷6.72mg/周、齐墩果酸3.42mg/周、总黄酮7.36mg/周。

    龙牙楤木激素自养型细胞系

    公开(公告)号:CN101629161A

    公开(公告)日:2010-01-20

    申请号:CN200910072196.4

    申请日:2009-06-05

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域。利用龙牙楤木(Aralia elate Seem.)幼苗的叶子和根为外植体,在MS+2,4-D(0.1-5.0mg/L)+蔗糖(2%)的培养基中诱导获得了一个松散、生长快速的黄色激素自养型细胞系Aral-1。该细胞系在无外源激素的1/2MS培养基中生长3周的鲜重和干重都增长约11倍;用紫外分光光度计测定其总皂苷和总黄酮含量分别为7.10%,1.51%。其中总皂苷含量明显比激素依赖型的白色愈伤组织中的高,与对照野生叶柄中的总皂苷含量相差不大,是野生叶总皂苷的60%;总黄酮含量明显比激素依赖型的白色愈伤组织和野生叶柄中的高,是野生叶总黄酮的68.9%。该细胞系具有无激素快速生长、液体中良好分散相和相对较高药用成分含量等特点,可作为细胞规模化培养生产药用成分的材料。

    一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法

    公开(公告)号:CN102893858A

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN201110214552.9

    申请日:2011-07-29

    Abstract: 一种通过培养龙牙楤木体细胞胚生产有用次生代谢物质的方法,其特征是:1)从无菌实生苗根段获得的胚性愈伤组织分别在分化培养条件和增殖培养条件下进行摇瓶悬浮培养;2)根据体细胞胚不同发育状况定期取材,并计算它们的生物生长量;3)分析体细胞胚各发育时期材料中楤木总皂苷、齐墩果酸、总黄酮的累积;4)体细胞胚苗中各成分含量最高,总皂苷占栽培植株根中含量的29.7%;齐墩果酸占栽培植株根中含量的29.9%;总黄酮占栽培植株叶中含量的42.8%,且体细胞胚苗中三种物质累积效率最高,分别为:总皂苷6.72mg/周、齐墩果酸3.42mg/周、总黄酮7.36mg/周。

    龙牙楤木激素自养型细胞系

    公开(公告)号:CN101629161B

    公开(公告)日:2012-02-01

    申请号:CN200910072196.4

    申请日:2009-06-05

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域。利用龙牙楤木(Aralia elate Seem.)幼苗的叶子和根为外植体,在MS+2,4-D(0.1-5.0mg/L)+蔗糖(2%)的培养基中诱导获得了一个松散、生长快速的黄色激素自养型细胞系Aral-1。该细胞系在无外源激素的1/2MS培养基中生长3周的鲜重和干重都增长约11倍;用紫外分光光度计测定其总皂苷和总黄酮含量分别为7.10%,1.51%%。其中总皂苷含量明显比激素依赖型的白色愈伤组织中的高,与对照野生叶柄中的总皂苷含量相差不大,是野生叶总皂苷的60%;总黄酮含量明显比激素依赖型的白色愈伤组织和野生叶柄中的高,是野生叶总黄酮的68.9%。该细胞系具有无激素快速生长、液体中良好分散相和相对较高药用成分含量等特点,可作为细胞规模化培养生产药用成分的材料。

    一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法

    公开(公告)号:CN102907318B

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201110217125.6

    申请日:2011-08-01

    Abstract: 本发明主要提供一种高效无性快繁三七再生植物的方法利--用生物反应器大量培养三七体细胞胚。从不定根诱导获得的三七胚性愈伤组织增殖后,在含有0.5mg/L 2,4-D的MS条件下,100%的愈伤组织都产生了球形体细胞胚,且产生的体细胞胚数量最多。10.0g(约1.65×104个)球形胚培养在3L生物反应器内,反应器内装有1.5L不加任何植物生长调节剂的1/2MS液体培养基,空气通入量为0.15vvm。4周后球形胚都发育为子叶体细胞胚,且生物生长量增加约为原来的8倍。液体或固体培养获得的子叶体细胞胚在含加有2.0mg/LGA3的1/2MS培养基中萌发成正常体细胞胚苗,继而在不含任何植物生长调节剂的1/2MS培养基中继代。生长良好的幼苗移栽入装有人工土壤(泥煤苔和泥质岩(3∶1,v∶v))的营养杯中,温室训化成活率较高。

    一种利用生物反应器培养体细胞胚快繁三七再生植株的方法

    公开(公告)号:CN102907318A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201110217125.6

    申请日:2011-08-01

    Abstract: 本发明主要提供一种高效无性快繁三七再生植物的方法利--用生物反应器大量培养三七体细胞胚。从不定根诱导获得的三七胚性愈伤组织增殖后,在含有0.5mg/L 2,4-D的MS条件下,100%的愈伤组织都产生了球形体细胞胚,且产生的体细胞胚数量最多。10.0g(约1.65×104个)球形胚培养在3L生物反应器内,反应器内装有1.5L不加任何植物生长调节剂的1/2MS液体培养基,空气通入量为0.15vvm。4周后球形胚都发育为子叶体细胞胚,且生物生长量增加约为原来的8倍。液体或固体培养获得的子叶体细胞胚在含加有2.0mg/LGA3的1/2MS培养基中萌发成正常体细胞胚苗,继而在不含任何植物生长调节剂的1/2MS培养基中继代。生长良好的幼苗移栽入装有人工土壤(泥煤苔和泥质岩(3∶1,v∶v))的营养杯中,温室训化成活率较高。

    一种通过体细胞胚及次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法

    公开(公告)号:CN101548646A

    公开(公告)日:2009-10-07

    申请号:CN200910072102.3

    申请日:2009-05-25

    Abstract: 本发明提供了一种通过体细胞胚和次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法。本发明以龙牙楤木幼苗的叶子、叶柄和根段为外植体,在IBA浓度分别为3.0mg/L、2.0mg/L、0.3mg/L和2%蔗糖的SH培养中暗培养35天,三种外植体的体细胞胚诱导率都可达到100%,且平均每个外植体都产生较多的体细胞胚数(8.6-11.3个)。蔗糖浓度和IBA都可以影响次生体细胞胚的产生,在3.0mg/L IBA+2%蔗糖+SH培养基的培养条件下,中暗培养4周后,100%的体细胞胚上都有次生体细胞胚生成。将获得的成熟初生体细胞胚和次生体细胞胚转入无激素的WPM培养基中,都可迅速萌发生长为小苗。约5cm的健壮小苗移栽土壤中,成活率可达89%。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得再生植株的方法,可用于龙牙楤木苗木产业化生产。

    一种通过体细胞胚及次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法

    公开(公告)号:CN101548646B

    公开(公告)日:2011-12-07

    申请号:CN200910072102.3

    申请日:2009-05-25

    Abstract: 本发明提供了一种通过体细胞胚和次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法。本发明以龙牙楤木幼苗的叶子、叶柄和根段为外植体,在IBA浓度分别为3.0mg/L、2.0mg/L、0.3mg/L和2%蔗糖的SH培养中暗培养35天,三种外植体的体细胞胚诱导率都可达到100%,且平均每个外植体都产生较多的体细胞胚数(8.6-11.3个)。蔗糖浓度和IBA都可以影响次生体细胞胚的产生,在3.0mg/L IBA+2%蔗糖+SH培养基的培养条件下,中暗培养4周后,100%的体细胞胚上都有次生体细胞胚生成。将获得的成熟初生体细胞胚和次生体细胞胚转入无激素的WPM培养基中,都可迅速萌发生长为小苗。约5cm的健壮小苗移栽土壤中,成活率可达89%。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得再生植株的方法,可用于龙牙楤木苗木产业化生产。

    一种利用小型简易生物反应器培养人参不定根生产人参皂苷的方法

    公开(公告)号:CN102898493A

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN201110214567.5

    申请日:2011-07-29

    Abstract: 本发明提供了一种利用小型玻璃生物反应器(3~10L)培养人参不定根的方法。首先将长度约1.0cm的人参不定根培养在装有2.0L 1/2SH培养基的3L反应器内培养,该培养基含3.0mg/L IBA和20g/L蔗糖。定期分析人参不定根的生长和三种人参皂苷(Rg1、Re、Rb1)的累积,确定了人参不定根在生物反应器内的最佳收获周期为7周。3L生物反应器培养基中三种蔗糖浓度(20g/L、40g/L、60g/L)中,20g/L、40g/L两个浓度的蔗糖对人参不定根的人参不定根的生长和皂苷的累积优于60g/L蔗糖,两者无显著差别,但从节约角度考虑,应该选择20g/L蔗糖浓度用于生产。该浓度下,人参皂苷含量和产量分别为5.16mg/g、30.71mg。5和10L生物反应器内在初始接种量分别为:10、15、20g和20、25、30g中,最佳量分别为15和30g,其不定根的生长量分别为9.29和19.17g,皂苷含量分别为5.16和4.58mg/g。生物反应器内培养7周的人参与栽培4年的人参相比,人参皂苷Rg1和Re含量相差不大;栽培人参中Rb1的含量远高于生物反应器中培养得人参不定根中的含量。本发明可为人参不定根的小规模和进一步扩大化培养提供技术支持和参数,也可以作为大规模生产提供人参不定根种子生产方法。

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