公开(公告)号：CN112941077B

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN202110202177.X

申请日：2021-02-23

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 刘桂丰 ,  王伟 ,  邱志楠 ,  李爽 ,  姜静 ,  陈肃

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/87 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除GLK基因的CRISPR/Cas9系统及其应用，属于分子生物学技术领域。本发明通过设计、构建、筛选，最终提供一些基于CRISPR/Cas9系统，同时能靶向白桦GLK基因的高效gRNA及靶位点序列，具体以白桦GLK基因为编辑靶基因，将体外纯化的Cas9蛋白与GLK‑gRNA混合后的核糖核蛋白复合体RNP，通过微粒轰击白桦愈伤组织，初步建立无T‑DNA插入基因编辑技术，利用该基因编辑技术获取了白桦黄叶植株，这为丰富白桦品种以及快速创制白桦植物突变体提供了崭新思路。

公开(公告)号：CN112941077A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110202177.X

申请日：2021-02-23

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 刘桂丰 ,  王伟 ,  邱志楠 ,  李爽 ,  姜静 ,  陈肃

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/87 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除GLK基因的CRISPR/Cas9系统及其应用，属于分子生物学技术领域。本发明通过设计、构建、筛选，最终提供一些基于CRISPR/Cas9系统，同时能靶向白桦GLK基因的高效gRNA及靶位点序列，具体以白桦GLK基因为编辑靶基因，将体外纯化的Cas9蛋白与GLK‑gRNA混合后的核糖核蛋白复合体RNP，通过微粒轰击白桦愈伤组织，初步建立无T‑DNA插入基因编辑技术，利用该基因编辑技术获取了白桦黄叶植株，这为丰富白桦品种以及快速创制白桦植物突变体提供了崭新思路。