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公开(公告)号：CN116536278A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310488497.5
申请日：2023-05-04
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N9/00 , C12N15/52 , C12N15/113 , C12N15/70 , C12N15/87 , A01K67/033 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种柳蝙蛾液泡ATP酶A亚基(PeV‑ATPase A)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成PeV‑ATPase A基因开放阅读框的特异性引物对SEQ ID NO：4和SEQ ID NO:5，经过基因克隆获得PeV‑ATPase A基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。通过对柳蝙蛾幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰PeV‑ATPase A基因的表达，柳蝙蛾幼虫出现进食障碍死亡等异常表型，靶标基因表达量显著降低，幼虫死亡率升高。本发明为林业柳蝙蛾的害虫防治提供高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN113046386A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202110311143.4
申请日：2021-03-24
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开了一种水曲柳高效遗传转化方法，选取水曲柳种子浸泡24h，去掉外种皮，表面消毒后进行预培养，在预培养时加柠檬酸钾，将预培养之后的成熟合子胚子叶部分及胚根部分切去，剩余的下胚轴放入WY4培养基中，密封好后，放入超声波清洗机中超声90s，把WY4培养基倒掉，将下胚轴与OD600＝0.6的农杆菌菌液混合后密封好，放入真空装置中，真空泵开启后约3min，真空压力达到0.8Mpa，在此压力下持续10‑15min，关闭真空泵开关，打开阀门，2min后恢复为标准大气压，在超净工作台中将下胚轴取出，无菌滤纸吸去多余菌液后，将下胚轴接入不定芽诱导培养基中，之后按照常规方法进行共培养、脱菌、选择培养、PCR检测，确定转基因植株。该方法的建立，一方面可用于提高水曲柳的转化效率，达到遗传转化的要求；其次，可以用于水曲柳遗传转化辅助育种；第三，也可以通过遗传转化筛选突变体，获得优良品种。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116970586A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202310488676.9
申请日：2023-05-04
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/113 , C12N15/87 , A01K67/033 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了柳蝙蛾几丁质合成酶1(PeCHS1)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成PeCHS1基因开放阅读框的特异性引物对，经过基因克隆获得PeCHS1基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。对柳蝙蛾幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰PeCHS1基因的表达，5d后处理组取食相较对照组逐渐减少，活动缓慢，在死亡幼虫中发现蜕皮异常及体表发育异常的表型，8d后幼虫死亡率为50％，此时GFP对照组为30％，效果显著。本发明在林业柳蝙蛾害虫的防治中具有高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN116622748A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310469455.7
申请日：2023-04-27
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开了一种缀叶丛螟液泡ATP酶A亚基(LmV‑ATPaseA)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成LmV‑ATPaseA基因开放阅读框的特异性引物对SEQ ID NO：4和SEQ ID NO:5，经过基因克隆获得LmV‑ATPaseA基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。通过对缀叶丛螟幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰LmV‑ATPaseA基因的表达，缀叶丛螟幼虫出现进食障碍死亡等异常表型，靶标基因表达量显著降低，幼虫死亡率升高。本发明为林业缀叶丛螟的害虫防治提供高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN116355925A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310476224.9
申请日：2023-04-27
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/54 , C12N15/113 , C12N15/87 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明公开了缀叶丛螟几丁质合成酶1(LmCHS1)基因、其dsRNA及其合成方法和抗虫性应用，通过转录组分析，设计并合成LmCHS1基因开放阅读框的特异性引物对，经过基因克隆获得LmCHS1基因序列，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，然后选择序列为SEQ ID NO：3的基因片段为RNAi靶序列，设计并合成带有酶切位点的引物对SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7，PCR扩增，构建原核表达载体并诱导dsRNA表达。对缀叶丛螟幼虫进行dsRNA的饲喂，干扰LmCHS1基因的表达，24h观察到了幼虫出现体表异常，部分幼虫无法正常完成蜕皮过程或蜕皮后不能形成正常体表而死亡等异常现象，96h后幼虫死亡率为72.22％，此时GFP对照组为40％，效果显著。本发明在林业缀叶丛螟害虫的防治中具有高效性、特异性和安全性的广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN213566790U
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202022453085.2
申请日：2020-10-29
Applicant: 东北林业大学
IPC: B65B51/10
Abstract: 本实用新型涉及三角瓶封口设备技术领域，且公开了一种植物组织培养用的三角瓶自动封口机，包括生产基座，所述生产基座的内部固定安装有电动机，所述电动机的输出轴贯穿出生产基座并通过联轴器固定连接有放置盘。该实用新型，通过底部环形盘与顶部环形盘之间夹持有环形塑料膜，环形塑料膜的内部设置有均匀分布的圆形塑料透气膜，当装置运动可带动橡胶封口皮套往复运动时，可进入安装口内部，推动圆形塑料透气膜套设于三角瓶顶部，同时圆形塑料透气膜顶部的封口皮圈可套设于三角瓶瓶口处，从而达到对三角瓶的封装，使装置达到无需热塑封装，透气塑料膜可二次使用，且机械自动封装，简单快捷的效果。
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公开(公告)号：CN213632809U
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN202022453084.8
申请日：2020-10-29
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本实用新型公开了一种多功能试剂瓶取样器固定架，属于取样器技术领域，其技术要点包括试剂瓶，所述试剂瓶的右侧设置有固定架，所述固定架的左侧转动连接有两个定位转轴，两个所述定位转轴的左侧均固定安装有定位架，两个所述定位转轴的表面均套设有扭力弹簧，所述固定架内壁的左侧固定安装有两个定位块，两个所述扭力弹簧靠近定位架的一端贯穿并延伸至定位架的内部，两个所述扭力弹簧靠近固定架的一端均贯穿固定架并与相邻所述定位块固定连接，两个所述定位架相对的一侧均与试剂瓶的表面相贴合。该实用新型，整个装置可伸缩调整大小，架体固定更牢靠，可折叠不用拆卸，多余的液体不会残留在取样器上，打开清洗均较为方便。
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