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公开(公告)号:CN112760278A
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN201910998825.X
申请日:2019-10-21
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了小鼠子宫基质细胞的实用高效培养方法,包括小鼠子宫组织的获得、胰蛋白酶双温消化,胶原蛋白酶温和消化,双酶三温消化法获取细胞悬液,根据贴壁时间不同利用差速贴壁和差速消化分离子宫基质细胞。本发明的技术关键是利用胰蛋白酶双温消化和胶原蛋白酶温和消化的双酶三温消化,根据贴壁时间不同利用差速贴壁和差速消化,严格控制消化温度和消化时间,以分离子宫基质细胞和上皮细胞等其他细胞,培养子宫基质细胞。利用本方法可获得高数量、高得率、高活力、无粘连的子宫基质细胞。与常规子宫基质细胞分离培养方法相比,该发明具有获得子宫基质细胞数量多、得率高、活力强等特点,避免了单酶单温或双酶单温以及消化条件不稳定等造成的子宫基质细胞损伤大、数量少、存活率低等缺点,解决了子宫基质细胞分离培养的困难问题,为进一步利用子宫基质细胞进行研究奠定基础。