公开(公告)号：CN118086382A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410437276.X

申请日：2024-04-12

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 王玲 ,  刘会君 ,  尹守东 ,  范丽娟 ,  史恭发

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12N15/29 ,  A01H5/02 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域和植物基因工程领域，公开了一种速效的农杆菌介导的鸢尾花粉遗传转化方法。该方法的主要步骤包括：选取茎干健壮、叶片无病虫害、花朵饱满未完全绽放的植株，于早上9点对其进行去雄，套袋；调整含有目标载体的工程农杆菌菌液至适当浓度，离心收集菌株，使用MSS重悬液重悬菌株，室温静止3h；收集花朵刚绽放花药未炸开时的花粉，将花粉转移至去雄花朵的柱头上，使用1ml注射器注射农杆菌MSS重悬液至含有花粉的柱头，用手指轻轻摩挲柱头，使花药充分浸泡在重悬液中，套密封遮光袋静置30min；授粉8h后，使用注射器吸取重悬液注射花粉管，使用密封遮光袋避光3d，然后去除遮光袋，使用授粉袋套袋，支架绑在处理植株上，避免倒伏；秋天收取种子后，使用MH液体培养基进行筛选培养，进行转基因植株鉴定。